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文檔簡介
1、 目的:本實驗應用熒光定量PCR(FQ-PCR)方法觀察CK20基因產(chǎn)物在直腸癌患者外周血中的表達情況,分析外周血中CK20基因產(chǎn)物的表達分別與直腸癌Dukes分期、組織學分型的關系;用FQ-PCR檢測CK20與術后常規(guī)病理兩種方法檢測腫瘤周圍腫大淋巴結,比較各自測得的淋巴結轉移率在Dukes各分期中有無差異,探討用FQ-PCR檢測CK20來預測直腸癌微轉移以及判斷患者預后的價值?! 》椒ǎ?.術中采集直腸癌患者腫瘤周圍腫大淋巴
2、結,剖開,一半做常規(guī)術后病理,另一半于-80℃保存?zhèn)溆谩?.由中山大學基因研究中心進行引物合成CK20mRNA引物及熒光探針堿基序列。3.將提取的RNA樣本進行逆轉錄反應;制備陽性模板的標準梯度;樣本總RNA作逆轉錄反應后,取5ul逆轉錄產(chǎn)物作為模板,制備樣品檢測體系;將制備好的陽性標準品和檢測樣本同時上機。 結論:1.CK20的特異性強,在正常人及腸道良性病患者外周血中無表達。2.直腸癌外周血中CK20的表達量與腫瘤分期有關,并且
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