多分子標(biāo)記物的RT-PCR法檢測結(jié)直腸癌淋巴結(jié)和外周血微轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)（reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR）檢測結(jié)直腸癌淋巴結(jié)、外周血中癌胚抗原（carcinoembryonic antigen ,CEA）、細(xì)胞角蛋白20（cytokeratin-20 CK20）、（matrixmetalloproteinase-7, MMP-7）的表達(dá)，評價(jià)3個(gè)腫瘤標(biāo)記物的聯(lián)合檢測對結(jié)直腸癌患者淋巴結(jié)和外周血微轉(zhuǎn)移的靈

2、敏度。 方法：收集了42例結(jié)直腸癌患者外周血標(biāo)本與260個(gè)淋巴結(jié)標(biāo)本和10例切除部分結(jié)腸的良性腸道疾病患者的25個(gè)淋巴結(jié)和外周血標(biāo)本，運(yùn)用RT-PCR檢測新鮮淋巴組織、外周血的三個(gè)上皮分子標(biāo)記物的表達(dá)：CEA、CK20,MMP-7. 結(jié)果：RT-PCR檢測45個(gè)病理檢查陽性的淋巴結(jié)，44個(gè)CEA呈現(xiàn)陽性（97.7％），42個(gè)CK20表達(dá)陽性，43個(gè)MMP-7表達(dá)陽性。215個(gè)病檢陰性的淋巴結(jié)，RT-PCR檢測出至少一個(gè)分

3、子標(biāo)志物表達(dá)陽性的淋巴結(jié)共85個(gè)：CEA陽性57個(gè)，CK20陽性43個(gè)，MMP-7陽性50個(gè)。CEA或CK20陽性的淋巴結(jié)共77個(gè)，CEA或MMP-7陽性的淋巴結(jié)共74個(gè)，CK20 或MMP-7陽性的淋巴結(jié)共71個(gè)。10例良性腸道疾病患者的25個(gè)淋巴結(jié)中僅一例患者的一個(gè)淋巴結(jié)CEA和MMP-7表達(dá)陽性。20例Ⅰ期和Ⅱ期病人中，11例患者28個(gè)淋巴結(jié)至少一個(gè)標(biāo)記物表達(dá)陽性，如果依據(jù)微轉(zhuǎn)移分子診斷則提示這11例患者病理分期應(yīng)為Ⅲ期. 23個(gè)

4、病人的外周血中至少一個(gè)分子標(biāo)記物表達(dá)陽性。CEA 陽性13個(gè)，CK20 陽性11個(gè)，MMP-7陽性10個(gè)，CEA或CK20陽性19個(gè)，CEA 或MMP-7陽性18個(gè)，CK20或 MMP-7 陽性17個(gè)。20例健康體檢者中一例的外周血CEA表達(dá)陽性。 結(jié)論：1 CEA和 CK20的聯(lián)合檢測可提高診斷結(jié)直腸癌患者淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的敏感度。 2 CEA,CK20,MMP-7的聯(lián)合檢測可提高診斷結(jié)直腸癌患者外周血微轉(zhuǎn)移的敏感度。3 RT-P