膽綠素對(duì)順鉑誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及機(jī)制探討.pdf

1、目的：探討膽綠素對(duì)順鉑誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法：首先利用不同濃度的順鉑(5,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100μmol/L)誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞凋亡，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，同時(shí)采用CCK8檢測(cè)細(xì)胞存活率。然后將NRK-52E細(xì)胞分為正常對(duì)照組、順鉑組、膽綠素+順鉑組，正常對(duì)照組不作任何處理，順鉑組給予50μmol/L順鉑刺激24h，膽綠素+順鉑組先用30μ

2、mol/L的膽綠素預(yù)處理細(xì)胞30min，再給予50μmol/L順鉑刺激24h，比較各組間細(xì)胞的凋亡率與存活率，BVR和HO-1的mRNA水平及BVR、HO-1、Total Akt、p-Akt、cleaved caspase3、pro-caspase3、Bax和Bcl-2的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：順鉑能誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞凋亡；隨著順鉑濃度的增加，凋亡率逐漸增加，至50μmol/L的順鉑刺激24h時(shí)凋亡率達(dá)到高峰，之后逐漸下降。

3、而CCK8提示隨著順鉑濃度的增加，細(xì)胞存活率逐漸下降。與正常對(duì)照組相比，順鉑組凋亡率明顯增加(p<0.01)、細(xì)胞存活率下降(p<0.05)；BVR、HO-1的mRNA水平升高(p<0.05)；BVR、HO-1、p-Akt、cleaved caspase3、Bax的蛋白水平明顯較高，Bcl-2蛋白水平明顯較低（p<0.05）。與順鉑組相比，膽綠素+順鉑組凋亡率下降(p<0.05)、細(xì)胞存活率增加(p<0.05)；BVR和HO-1的mRN

4、A水平下降(p<0.05)；BVR、HO-1、p-Akt、clea vedca spase3和Bax的蛋白水平明顯降低，Bcl-2蛋白水平明顯升高（p<0.05）。
　　結(jié)論：順鉑能誘導(dǎo)NRK-52E細(xì)胞凋亡。膽綠素能減少順鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，其保護(hù)作用可能是通過膽綠素-膽紅素氧化還原系統(tǒng)不斷消耗氧自由基，減少順鉑通過氧化應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞損傷來實(shí)現(xiàn)。順鉑誘導(dǎo)BVR酪氨酸磷酸化及HO-1的高表達(dá)，可能是細(xì)胞受外界損傷時(shí)自我保護(hù)的一種機(jī)制，