糖基化終產(chǎn)物對人腎小球系膜細胞纖維化相關(guān)因子表達的影響.pdf

1、目的：探討體外培養(yǎng)條件下糖基化終產(chǎn)物(AGEs)對人腎小球系膜細胞(HRMC)增殖以及轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)及纖維連接蛋白(FN)表達的影響及其可能的作用機制。
　　 方法：采用體外人腎小球系膜細胞系的培養(yǎng)方法，同時并制備糖化牛血清白蛋白(AGE-BSA)，分別用不同濃度的AGE-BSA作用相同時間和同一濃度的AGE-BSA干預(yù)不同時間。四唑鹽比色試驗(MTT)法測定細胞的生長情況；蛋白

2、質(zhì)免疫印跡(Western blotting)方法檢測細胞中RAGE的蛋白表達；半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法測定細胞TGF-β1、CTGF和FN的mRNA水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)方法測定細胞上清液中的TGF-β1蛋白含量。
　　 結(jié)果：(1)不同濃度的AGE-BSA干預(yù)系膜細胞48h和200mg/L濃度的AGE-BSA干預(yù)系膜細胞不同時間后，系膜細胞均明顯增殖，AGE-BSA各干預(yù)組與空白對照組、相同

3、濃度的BSA組或相同時間點的BSA組比較有顯著性差異(P＜0.05)。(2)在人腎小球系膜細胞中存在少量RAGE的表達，AGE-BSA能夠誘導(dǎo)系膜細胞中RAGE的表達增加；在加入不同濃度的AGE-BSA48h后以及加入200m妙L的AGE-BSA作用不同時間后，TGF-β1、CTGF和FN較空白對照組和相應(yīng)濃度或時間的BSA組均明顯升高(P＜0.05)。(3)AGE-BSA+抗RAGE抗體明顯抑制AGE-BSA誘導(dǎo)TGF-β1、CTGF