晚期糖基化終產物對心肌細胞的影響及機制研究.pdf

1、目的：以原代培養(yǎng)SD大鼠的乳鼠心肌細胞為研究對象，觀察晚期糖基化終產物（advanced glycation end products,AGEs）對心肌細胞的影響，探討氧化應激在AGEs誘導心肌細胞損傷及凋亡中的作用。
　　方法：采用酶消化法原代培養(yǎng)SD大鼠乳鼠心肌細胞，取體外培養(yǎng)的SD乳鼠心肌細胞隨機分為3組空白對照組、牛血清白蛋白組（BSA組）、糖基化牛血清白蛋白濃度梯度組（AGE-BSA組，濃度分別為20ug/ml、50ug

2、/ml、100ug/ml、200ug/ml）刺激48h后，CCK-8法檢測心肌細胞存活率，流式細胞術檢測心肌細胞凋亡率，熒光顯微鏡觀察活性氧（ROS）生成量，硫代巴比妥酸比色法測定細胞丙二醛（MDA）含量，黃嘌呤氧化酶法測定培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶（SOD）活性。
　　結果：
　　1.細胞鑒定：倒置顯微鏡下可見細胞成簇生長，有規(guī)律的自發(fā)性搏動；熒光顯微鏡下細胞胞漿內呈現(xiàn)綠色熒光，符合心肌細胞特性。
　　2.細胞活性變化：

3、BSA組細胞活性較空白對照組無明顯變化；AGE-BSA干預組細胞活性較空白對照組降低，且呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3.細胞凋亡率變化：BSA組細胞凋亡率較空白對照組無明顯變化；AGE-BSA干預組細胞凋亡率較空白對照組增加，且呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　4.氧化應激指標變化：BSA組細胞活性氧含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶含量較空白對照組無明顯變化；AGE-BSA干預組

4、較空白對照組細胞活性氧含量，丙二醛含量增加，而超氧化物歧化酶的活性降低，且呈劑量依賴性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：
　　1.晚糖基化終產物抑制心肌細胞活性，誘導細胞損傷及凋亡,并呈劑量依賴性。
　　2.晚糖基化終產物可以通過增強活性氧生成，增加脂質過氧化物MDA的生成，降低SOD的活性，從而降低細胞抗氧化能力，破壞細胞內環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，導致心肌細胞損傷及凋亡增加，且呈劑量依賴性，提示氧化應激可能參與了A