甘草次酸對表皮生長因子誘導的晶狀體上皮細胞增殖信號轉導機制的影響.pdf

1、目的:研究甘草次酸（GA）對體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞生長的影響，以及對重組人表皮生長因子（rhEGF）誘導的人晶狀體上皮細胞（LECs）內環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）的影響及其機理。 方法:體外培養(yǎng)人晶狀體上皮細胞株SR01/04，將培養(yǎng)的第3代細胞分為五組。A組為實驗組：培養(yǎng)液+LECs+rhEGF+GA，根據(jù)GA不同濃度（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L），分為A1，A2，A3組；B

2、組為增殖組：培養(yǎng)液+LECs+rhEGF；C組為對照組：培養(yǎng)液+LECs。取第3代LEC在96孔板中培養(yǎng)24小時后，在光鏡下觀察細胞形態(tài)學改變；用MTT測定法觀察GA對LECs增殖的影響；用放射免疫分析法檢測各組LECs內cAMP和cGMP含量，并進行比較。 結果: 1.各組LECs形態(tài)學觀察（光鏡）：（1）增殖組及對照組LEC細胞均增加，增殖組細胞數(shù)量較對照組多。（2）實驗組細胞密度較增殖組明顯降低，漂浮細胞較增殖組多

3、。（3）A1與A2相比較，細胞密度及漂浮細胞數(shù)量無明顯差別，A3組內細胞密度較A1及A2組明顯降低，漂浮細胞數(shù)量較A1及A2組明顯增加。 2.GA對LECs增殖的作用：（1）對照組、增殖組及藥物組（A1，A2，A3）吸光值依次分別為，0.492±0.090，0.799±0.025，0.649±0.011，0.471±0.020，0.345±0.077。（2）各組間兩兩比較，除C組與A2組比較差異無顯著性（P>0.05），其余各組

4、間比較差異均有顯著性（P<0.01）。（3）GA抑制LECs增殖，半數(shù)抑制量（24小時）為34.509μmol/L。 3.各組LECs內cAMP的濃度及比較：（1）增殖組LECs內cAMP濃度為1.079±0.191pmol/mL，對照組為1.783±0.150pmol/mL，兩組比較有顯著差異性的（P<0.01）；（2）不同濃度的GA組（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L）LECs內cAMP濃度依次為1.4

5、06±0.104pmol/mL，1.892±0.223pmol/mL，2.441±0.418pmol/mL，分別與增殖組進行兩兩比較，均有顯著差異（P<0.01）；（3）不同濃度GA組LEC內cAMP濃度的組間兩兩比較，均有顯著性差異（P<0.01）；（4）對照組分別與3個不同藥物濃度組A1，A2，A3組LECs內cAMP濃度比較：C組分別與A1，A3組比較，有顯著差異（P<0.01），與A2組比較，無顯著差異（P>0.05）。

6、 4.各組LECs內cGMP的濃度及比較：（1）增殖組LECs內cGMP濃度為0.175±0.021pmol/mL，對照組為0.118±0.016pmol/mL，兩組比較是有顯著差異性的（P<0.01）；（2）不同濃度的GA組（7.5μmol/L，15μmol/L，30μmol/L）LECs內cGMP濃度依次為0.136±0.006pmol/mL，0.107±0.005pmol/mL，0.078±0.007pmol/mL，分別與增殖組進

7、行兩兩比較，均有顯著差異（P<0.01）；（3）不同濃度GA組LECs內cGMP濃度的組間兩兩比較，均有顯著性差異（P<0.01）。（4）對照組分別與3個不同藥物濃度組A1，A2，A3組LECs內cGMP濃度比較：C組分別與A1，A3組比較，有顯著差異（P<0.01），與A2組比較，無顯著差異（P>0.05）。 結論: 1.rhEGF能促進LECs的增殖。 2.GA能升高LECs內cAMP濃度，降低LECs內cG