人工晶狀體后表面分區(qū)改性對晶狀體上皮細(xì)胞遷移的影響的研究.pdf

1、目的:
　　評價(jià)應(yīng)用大氣壓下輝光放電(APGD)設(shè)備及靜電層層自組裝(LBL)技術(shù)在人工晶狀體(IOL)后表面中央?yún)^(qū)構(gòu)建TGF-β2抗體多層膜，并在IOL后表面周邊部形成高粘性表面，從而制備出后表面分區(qū)改性的新型IOL的可行性，并檢測新型IOL的理化性質(zhì)和相關(guān)分子生物學(xué)指標(biāo)。
　　方法:
　　首先采用APGD等離子體對IOL后表面進(jìn)行處理，使IOL后表面粘性增加并帶上大量負(fù)電荷。然后應(yīng)用LBL技術(shù)，在IOL后表面光學(xué)部

2、中央直徑4mm的范圍內(nèi)吸附一層聚乙烯亞胺(PEI)，再在IOL后表面PEI沉積的范圍內(nèi)依次沉積TGF-β2抗體和聚賴氨酸(PLL)，連續(xù)4個(gè)循環(huán)后，再在IOL后表面PEI沉積的范圍內(nèi)沉積一層TGF-β2抗體，從而在IOL后表面光學(xué)部中心直徑4mm的范圍內(nèi)構(gòu)建起PEI-（TGF-β2抗體/PLL）4-（TGF-β2抗體）多層膜。IOL后表面周邊部1mm的范圍內(nèi)不組裝TGF-β2抗體多層膜，從而制備出后表面分區(qū)改性的新型IOL。采用石英晶體

3、微天平(QCM)模擬并監(jiān)測LBL的組裝過程;以原子力顯微鏡(AFM)和場發(fā)射掃描電子顯微鏡(FESEM)觀察新型IOL的表面形態(tài)變化;應(yīng)用免疫熒光和激光掃描共焦顯微鏡檢查(LSCM)觀察IOL表面自組裝膜內(nèi)TGF-β2抗體的免疫活性;以體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)評價(jià)新型IOL對LECs遷移的影響。
　　結(jié)果:
　　應(yīng)用QCM模擬TGF-β2抗體多層膜的自組裝過程，發(fā)現(xiàn)TGF-β2抗體和PLL可以以線性增長的方式順利逐層沉積。應(yīng)用FESE

4、M檢查發(fā)現(xiàn)新型IOL的后表面中央?yún)^(qū)和周邊區(qū)形態(tài)均光滑平整，未見明顯裂痕，與未處理IOL的表面形態(tài)無明顯區(qū)別。應(yīng)用AFM檢查發(fā)現(xiàn)新型IOL后表面周邊部和中央?yún)^(qū)表面形態(tài)不相同，證實(shí)IOL后表面分區(qū)處理獲得成功。免疫熒光和LSCM檢查發(fā)現(xiàn)TGF-β2抗體多層膜成功組裝到新型IOL的后表面，而且僅局限于中央4mm的范圍內(nèi)，并且新型IOL后表面中央部自組裝膜中TGF-β2抗體保持了良好的免疫活性，新型IOL后表面周邊1mm寬的區(qū)域內(nèi)無TGF-β2