HCMV感染對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞縫隙連接基因及蛋白的影響.pdf

1、人巨細胞病毒(Human cytomegalovirus，HCMV)屬于β亞科皰疹病毒，在人群中感染非常普遍，一系列的研究顯示HCMV與神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞的發(fā)病機制關(guān)系密切。在腦組織中，細胞之間傳遞信息主要依靠于細胞縫隙連接通訊（gap juncion intercelluar communication，GJIC），細胞縫隙連接通訊是機體中傳導(dǎo)信號最直接的通訊方式，另外，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞之間的GJIC被預(yù)測在膠質(zhì)瘤侵襲中起到關(guān)鍵性的作用，并

2、且，腦膠質(zhì)瘤的侵潤性是臨床中治療的難點?？p隙連接基因及蛋白的表達和功能異常與多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)，此方面的研究在未來將是新的方向和重點。
　　本研究擬探討HCMV感染對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞縫隙連接基因及蛋白的影響，并深入了解縫隙連接蛋白在腫瘤病理機制中的作用。分別培養(yǎng)并使用HCMV ADl69株（MOI=1）感染原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞和U251細胞，使用相差顯微鏡觀察細胞的形態(tài)學(xué)變化，觀察結(jié)果顯示原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及U251細胞經(jīng)HCMV感

3、染后逐漸變大變圓。檢測HCMV感染原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及U251細胞后縫隙連接基因GJA8和GJB1的表達，結(jié)果顯示縫隙連接基因GJA8和GJB1在原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及U251細胞中均可表達。Real-time PCR檢測原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及U251細胞經(jīng)HCMV感染后縫隙連接基因GJA8和GJB1的表達，結(jié)果表明原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞經(jīng)HCMV感染0h、12h、24h、48h后，GJB1的相對表達水平下降（P＜0.05），GJA8在24h后

4、相對表達水平下降（P＜0.05），在24h之前無明顯變化（P＞0.05）；U251細胞經(jīng)HCMV感染0h、12h、24h、48h后，GJA8和GJB1的相對表達量均是下降趨勢（P＜0.05）。再使用Western-Blot檢測原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及U251細胞經(jīng)HCMV感染后縫隙連接蛋白Cx50及Cx32的表達，結(jié)果表明，原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞經(jīng)HCMV感染0h、12h、24h、48h后，Cx32的相對表達量減少（P＜0.05），Cx50的相

5、對表達量在24h之前無明顯變化（P＞0.05），24h后相對表達量出現(xiàn)減少趨勢（P＜0.05）；U251細胞經(jīng)HCMV感染0h、12h、24h、48h后，Cx50和Cx32的相對表達量均是下降趨勢（P＜0.05）。使用細胞劃痕法檢測HCMV感染對U251細胞的遷移能力的影響，結(jié)果顯示經(jīng)HCMV感染的U251細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力增強。以上這些實驗結(jié)果表明原代神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞和U251細胞經(jīng)HCMV感染后，縫隙連接基因及蛋白的表達量有所差異，此