星形膠質(zhì)細胞縫隙連接通訊對深部腦白質(zhì)低灌注損傷的影響.pdf

1、本文分為兩個部分進行探討：
　　第一部分 星形膠質(zhì)細胞縫隙連接蛋白Cx43在慢性腦白質(zhì)神經(jīng)血管單元缺血性損害中的影響
　　目的：研究小鼠BCAS造模后不同時間，腦白質(zhì)髓鞘相關蛋白MAG、MBP的表達量的改變，特異性敲除星形膠質(zhì)細胞connexin43對小鼠腦白質(zhì)低灌注損害的影響，少突膠質(zhì)細胞增殖分化的不同。
　　方法：根據(jù)Cre-loxP技術獲得星形膠質(zhì)細胞connexin43敲除的C57小鼠，利用雙側頸總動脈狹窄技術

2、建立其腦白質(zhì)低灌注模型。通過蛋白免疫印跡法對不同實驗組小鼠白質(zhì)區(qū)域髓鞘相關蛋白進行半定量。通過免疫熒光染色技術觀察各實驗組小鼠白質(zhì)少突膠質(zhì)細胞的增殖分化改變和郎飛氏結相關結構的改變情況。
　　結果：在BCAS模型中，低灌注條件下可以導致小鼠腦白質(zhì)脫髓鞘改變，白指處成熟少突膠質(zhì)細胞減少。敲除星形膠質(zhì)細胞cx43后，可以減輕髓鞘脫失的程度，成熟少突膠質(zhì)細胞減少降低，減輕軸突郎飛氏結結構的改變，并促使增殖的少突前體細胞分化成熟。

3、　　結論：敲除星形膠質(zhì)細胞cx43可以減輕低灌注導致的小鼠腦白質(zhì)損傷，有一定的神經(jīng)保護作用。
　　第二部分 探索星形膠質(zhì)細胞Cx43介導的縫隙連接通訊在腦白質(zhì)慢性低灌注性損傷中的作用機制
　　目的：在研究特異性調(diào)控星形膠質(zhì)細胞Cx43對腦白質(zhì)低灌注損傷的影響基礎上，探索該縫隙連接通道通訊在深部腦白質(zhì)低灌注性損傷的機制。
　　方法：利用微透析的方法，透析不同實驗組小鼠白質(zhì)部位細胞間隙各種小分子成分，通過熒光化學和電化學的

4、方法檢測各組小鼠透析液中小分子：乳酸、谷氨酸、腺苷的變化；通過離體核磁技術，檢測了各組小鼠胼胝體部位各種代謝產(chǎn)物的變化情況。
　　結果：在生理情況下，特異性敲除星形膠質(zhì)細胞縫隙連接蛋白Cx43對小鼠的腦白質(zhì)微環(huán)境中并沒有明顯影響；在腦白質(zhì)低灌注損傷第3天，Cx43 lox/lox小鼠腦組織內(nèi)的腺苷、乳酸和谷氨酸出現(xiàn)明顯上升，而在GFAP Cre-Cx43 lox/lox小鼠腦組織內(nèi)保持低平狀態(tài)，其中谷氨酸和乳酸的結果具有統(tǒng)計學意義