5-氨基乙酰丙酸介導光動力治療大鼠甲狀旁腺功能亢進的實驗研究.pdf

1、背景與目的:
　　甲狀旁腺功能亢進癥(hyperparathyroidism)一般分為原發(fā)性(Primaryhyperparathyroidism，PHPT)、繼發(fā)性（secondary hyperparathyroidism，SHPT）、三發(fā)性（tertiary hyperparathyroidism，3HPT）三種類型，其共同特征是甲狀旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）的合成和分泌過多。對大部分繼發(fā)于甲

2、狀旁腺(parathyroidgland，PTG)增生所致的甲狀旁腺功能亢進癥來說，其治療以甲狀旁腺切除術(parathyroidectomy)最為有效。手術治療往往需要比較嚴格的適應癥或部分患者不愿意接受手術而使其應用受到限制。對于多發(fā)或非典型腺瘤者，術中被遺漏或切除相對不足等時有發(fā)生，而切除過多則可導致術后持久性的低鈣血癥，甚至發(fā)生永久性甲狀旁腺功能減低（hypoparathyroidism）的可能。近年來發(fā)展起來的微創(chuàng)手術，雖然具

3、有創(chuàng)傷性小、耐受性好、術后甲旁減發(fā)生率低等優(yōu)點，但其適應人群僅限于單個腺瘤的患者。
　　光動力治療（photodynamic therapy，PDT）是近年來興起的一種基于光化學反應的新療法。其基本原理是利用光敏劑在某些特定組織中的差異性高濃度蓄積，在氧的存在下，經特定波長（630nm）光的照射后，生成活性氧(reactive oxygen species，ROS)，進而產生一系列氧化產物誘導細胞死亡，從而達到治療腫瘤等病變組織的

4、目的。其相比于傳統(tǒng)手術、放療或化療，具有適應癥廣、特異性高、副作用少等優(yōu)點，目前已廣泛應用于各種腫瘤、皮膚病、甚至感染性疾病的治療當中。已有研究表明，將光敏劑5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid，5-ALA）注射入大鼠或人體內后，其中間代謝產物原卟啉Ⅸ（ProtoporphyrinⅨ，PpⅨ）（光敏物質）在正常或增生的甲狀旁腺組織中具有與周圍組織相比更高濃度的蓄積。但是否能產生光動力效應，目前仍不清楚。
　

5、　本研究旨在分析5-ALA介導PpⅨ在大鼠甲狀旁腺及其周圍組織當中的分布特點，明確5-ALA所介導的光動力療法(5-ALA PDT)作用于正常大鼠甲狀旁腺的安全性與有效性，并嘗試將5-ALA PDT應用于繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進癥(SHPT)大鼠模型的治療中。
　　方法:
　　1、將5-ALA注射入大鼠腹腔后切取甲狀旁腺(PTG)、甲狀腺(TG)及周圍肌肉組織，分別測定其內的PpⅨ濃度進行比較，同時明確PpⅨ濃度與5-ALA注

6、射劑量及作用時間之間的關系;
　　2、按光敏劑劑量和光照時間進行隨機分組，手術暴露PTG及其周圍組織后行光動力照射，檢測照射前后血清甲狀旁腺激素(PTH)、總鈣(Ca)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、促甲狀腺素(TSH)水平，并觀察各組織形態(tài)學上的變化。
　　3、通過5/6腎切除結合高磷飼養(yǎng)制備SHPT大鼠模型后分多次對其行PDT照射，并比較每次照射前后血清PTH水平的變化。
　　結果:
　　1、在

7、各時間點上檢測到PTG內PpⅨ濃度均高于TG及周圍肌肉組織(p＜0.05);PTG內PpⅨ濃度隨5-ALA作用時間逐漸升高，在1.5h檢測到最大值（77.38±8.92）ug/g，之后開始逐漸下降，PTG內PpⅨ濃度隨5-ALA注射劑量增加而逐漸升高(p＜0.05)，當5-ALA注射劑量由400mg/kg增加到600mg/kg時，PTG內PpⅨ含量仍有所上升，但差異已無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);
　　2、單獨使用光敏劑或光照對P

8、TG功能無影響，在PDT照射0.25d后即檢測到血清PTH、總Ca顯著下降(p＜0.05)，而照射前后血清T3、T4、TSH始終無明顯改變(p＞0.05)。PDT照射后血清PTH水平隨5-ALA注射劑量的增加、光照時間延長而降低，與對照組（0mg/kg，0min）相比差異顯著(p＜0.05);組織學檢查顯示PDT照射后PTG組織包膜仍完整，但主細胞明顯減少，脂肪細胞增多，TG與周圍肌肉組織未見到明顯變化。
　　3、5/6腎切除結合

9、高磷飼養(yǎng)28天后大鼠血清Cr、PTH水平明顯高于手術前(p＜0.05)，SHPT模型大鼠經多次PDT照射后的血清PTH水平隨照射次數的增加而降低，經PDT（100mg/kg，10min）照射3次后的PTH水平與手術前比較已無顯著差異(p＞0.05)。
　　結論:
　　1、5-ALA介導PpⅨ在大鼠PTG內的蓄積濃度明顯高于周圍組織，并與5-ALA注射劑量及作用時間相關;
　　2、5-ALA PDT可對正常大鼠PTG的組