茶樹(shù)花提取物的抗氧化活性及其對(duì)HepG2細(xì)胞的抗增殖活性.pdf

1、科技的進(jìn)步促進(jìn)了人類(lèi)生活品質(zhì)的提高和社會(huì)的發(fā)展，但同時(shí)也造成了空氣污染、農(nóng)藥殘留、重金屬、輻射等副作用，給人們帶來(lái)了額外的機(jī)體過(guò)氧化負(fù)擔(dān)，激發(fā)活性氧自由基的生成，而活性氧自由基是一種因輻射或者機(jī)體自然代謝的副產(chǎn)物的影響而產(chǎn)生的誘變劑，包括O2、H2O2、·OH等，一旦在體內(nèi)長(zhǎng)期積累，就會(huì)對(duì)DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)造成氧化性損傷，這些損傷是機(jī)體衰老和老年退行性疾病，如心腦血管疾病、免疫系統(tǒng)衰退、腦功能障礙等的主要原因。尤其是DNA的氧化損傷會(huì)

2、導(dǎo)致DNA畸變和原癌基因、腫瘤抑制基因突變，誘變出細(xì)胞的無(wú)限增殖能力，導(dǎo)致癌癥和腫瘤。近年來(lái)，在“藥食同源”這一新概念的倡導(dǎo)下，通過(guò)攝入天然植物功能食品來(lái)清除體內(nèi)多余的自由基，防治慢性疾病，延緩衰老已成為重要的保健手段。關(guān)于各種功能食品的研究不斷深入，不少天然植物，如茶葉，已經(jīng)被證實(shí)具有抗氧化、抗增殖、抗輻射等保健效果和對(duì)疾病的防治能力。茶樹(shù)花與茶葉成分類(lèi)似，蘊(yùn)含有大量的活性物質(zhì)，且產(chǎn)量巨大，理論上也有強(qiáng)力的抗氧化和抗增殖等效果，但長(zhǎng)期

3、被視為茶葉外無(wú)用的副產(chǎn)品，其相關(guān)的功能研究也很少，造成了資源的浪費(fèi)。因此，本研究著力于探明不同茶樹(shù)花品種、不同部位（全花、花瓣和花粉）的抗氧化、抗增殖能力以及他們之間的相關(guān)性。主要研究?jī)?nèi)容和成果如下：
　　1．采用ORAC法、PSC法和CAA法對(duì)六個(gè)茶樹(shù)花全花提取物進(jìn)行抗氧化活性評(píng)價(jià)，結(jié)果表明：四川群體品種的ORAC、PSC、CAA值（未經(jīng)PBS清洗）均是最高，分別為3504.99±281.65μmol Trolox/g、1442

4、.73±75.01μmol VC/g和24.01±0.20μmol Quercetin/g；四川群體品種的CAA值（經(jīng)PBS清洗）與最高的福選九號(hào)無(wú)顯著差異，為10.53±0.42μmol Quercetin/g。因此，在所測(cè)六個(gè)品種中，四川群體品種具有最高的體外抗氧化活性和細(xì)胞抗氧化活性，是抗氧化能力最強(qiáng)的茶樹(shù)花品種。
　　2．采用ORAC法、PSC法和CAA法對(duì)六個(gè)茶樹(shù)花花瓣和花粉提取物進(jìn)行抗氧化活性評(píng)價(jià)，結(jié)果表明：四川群體品

5、種的花瓣和花粉有最高（或與最高的值無(wú)顯著差異）的 ORAC值（2947.48±165.99μmol Trolox/g和4575.16±170.74μmol Trolox/g）、PSC值（632.09±73.91μmol VC/g和1060.50±82.28μmol VC/g）、經(jīng)PBS清洗的CAA值（11.19±0.37μmol Quercetin/g和11.73±0.56μmol Quercetin/g）和未經(jīng)PBS清洗的CAA值（2

6、4.29±1.39μmol Quercetin/g和25.71±0.26μmol/g）。因此，在所測(cè)六個(gè)品種中，四川群體品種茶樹(shù)花花瓣和花粉具有綜合最高的體外抗氧化活性和細(xì)胞抗氧化活性，是抗氧化能力最強(qiáng)的品種。
　　3．將各全花、花瓣和花粉提取物的ORAC、PSC和CAA值與其對(duì)應(yīng)的總酚、咖啡堿、兒茶素等含量進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明：總酚含量、總兒茶素含量與ORAC、PSC和CAA值之間存在顯著或極顯著正相關(guān)；兒茶素單體中的EGC

7、G與各抗氧化活性值均有極顯著（P＜0.01）的相關(guān)性，其相關(guān)性較其他單體更強(qiáng)且穩(wěn)定。EGCG的含量與抗氧化活性有最顯著的相關(guān)性，可以較好的預(yù)測(cè)茶樹(shù)花樣品的抗氧化能力。
　　4．用六個(gè)品種茶樹(shù)花的全花、花瓣和花粉提取物對(duì)HepG2人肝癌細(xì)胞進(jìn)行抗增殖活性的檢測(cè)，并計(jì)算其增殖率和半數(shù)效應(yīng)濃度（EC50）。結(jié)果顯示：在所有樣品中，福選九號(hào)的全花和花粉有最低的 EC50值，分別為55.28±17.98和63.95±9.77 mg/L，說(shuō)明

8、福選九號(hào)的全花和花粉有最強(qiáng)的抗增殖活性；四川群體品種的花瓣有最低的EC50值，為72.56±26.22 mg/L，所以四川群體品種的花瓣有最強(qiáng)的抗增殖活性。
　　5．將全花、花瓣和花粉提取物的各個(gè)EC50值與其對(duì)應(yīng)的ORAC、PSC、CAA值進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果顯示：樣品EC50與ORAC值（R2＝—0.389，P＜0.01）之間有極顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，與PSC值（R2＝—0.179，P＞0.05）無(wú)顯著相關(guān)性；與兩個(gè)CAA值也均無(wú)

9、顯著（P＞0.05）相關(guān)性，因此，ORAC抗氧化活性值與抗增殖活性有顯著的正相關(guān)。此外，ORAC、PSC、CAA值之間均存在極顯著（P＜0.01）相關(guān)性，表明本文所選擇的體外或間接體內(nèi)抗氧化活性評(píng)價(jià)方法對(duì)樣品的評(píng)價(jià)結(jié)果是一致的。
　　6．對(duì)茶樹(shù)花的全花、花瓣和花粉提取物的生化成分及抗氧化、抗增殖活性整體進(jìn)行顯著性分析，結(jié)果顯示：花粉和花瓣樣品的總酚含量顯著高于（P＜0.05）全花樣品，花粉和花瓣樣品之間無(wú)顯著差異；花粉樣品的總兒茶

10、素與酯型兒茶素含量最高（P＜0.05）；花粉和花瓣樣品的ORAC值顯著高于（P＜0.05）全花樣品，花粉和花瓣樣品之間無(wú)顯著差異（P＞0.05）；花粉樣品的PSC值最高（P＜0.05）， EC50值最低（P＜0.05）；全花、花瓣和花粉的CAA值均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。綜上，在六個(gè)重慶地區(qū)常見(jiàn)的茶樹(shù)花品種中，花粉提取物的酚類(lèi)物質(zhì)含量高，體外（in vitro）抗氧化能力強(qiáng)，抗增殖能力最強(qiáng)，花瓣次之；CAA抗氧化評(píng)價(jià)方法所得的值與部