1.mc3t3—e1細胞分化過程中dna甲基化的研究;2.taurine抑制破骨細胞分化的機制研究

1、中南大學博士學位論文1.MC3T3—E1細胞分化過程中DNA甲基化的研究;2.Taurine抑制破骨細胞分化的機制研究姓名：劉瑋申請學位級別：博士專業(yè)：內科學指導教師：廖二元20100501博+ 學位論文 中文摘要化基因5 0 個，低甲基化基因9 3 個，基質分泌期高甲基化基因9 6 個，低甲基化基因4 3 個，礦化期高甲基化基因5 2 個，低甲基化基因1 4 7 個。這些差異甲基化基因主要涉及程序性細胞死亡、轉錄調控、代謝、轉運以及信

2、號轉導等廣泛的生物學過程。M a s s A R R A Y D N A 甲基化定量分析結果與甲基化芯片結果吻合。基因啟動子區(qū)域D N A 甲基化抑制C a m k l d ，B m p r l b ，F b l n 7 ，I t g a 3 ，P i a s 2 ，P c d h a l 2 ，M d m 4 ，T m e m 5 4 m R N A 的表達，去甲基化藥物R G l 0 8 可促進細胞增殖，干預細胞后，D N A 高甲

3、基化基因m R N A 表達明顯增高。結論：培養(yǎng)0 天、1 0 天、2 4 天的M C 3 T 3 ．E 1 細胞可以代表其增殖期、基質分泌期、礦化期三個階段。對此三個階段細胞進行g D N A 甲基化芯片雜交，獲得了三個不同分化階段的D N A 甲基化譜。差異甲基化基因涉及廣泛的生物學過程?；騿幼訁^(qū)域D N A 甲基化負性調控成骨相關基因表達，去甲基化藥物R G l 0 8 可促進細胞增殖，促進D N A 高甲基化基因的表達。關鍵

4、詞：M C 3 T 3 - - E 1 細胞；成骨細胞分化；D N A 甲基化；甲基化芯片·一 第二部分T a u r i n e 抑制破煢鈕脾分化的機制研究膏赫第一章T a u r i n e 抑制破骨細胞分化的同時不影響成骨細胞O P G 與R A N K L 的表達目的：T a u r i n e 廣泛分布于哺乳動物血漿以及組織中，是哺乳動物體內中最重要的游離b e t a ．氨基酸。我們之前的研究發(fā)現T a u r i

5、 n e 可抑制破骨細胞的分化，但具體機制尚不十分清楚。本研究以成骨細胞與前破骨細胞共培養(yǎng)模型為研究對象，旨在探討T a u r i n e 是否通過影響成骨細胞O P G 與R A N K L 的表達來抑制破骨細胞的分化。方法：利用2 4 t J x 時內新生小鼠顱骨和6 —8 周齡小鼠四肢長骨分別分離，獲得成骨細胞和骨髓細胞，將成骨細胞與骨髓細胞進行共培養(yǎng)，同時給予不同濃度T a u r i n e 干預。共培養(yǎng)6 天后進行破骨細胞

6、抗酒石酸酸性磷酸酶( T R A C P ) 染色鑒定。同時采用r e a l ．t i m eP C R 檢i 貝l J T a u r i n e 對成骨細胞O P G 和R A N K L 表達的影響。結果：T a u r i n e 可抑制成骨細胞／骨髓細胞共培養(yǎng)誘導的破骨細胞分化，且與濃度相關。然而T a u r i n e 不影響成骨細胞O P G 和R A N K L 的表達。結論：T a u r i n e 可濃度依賴性