caveolin-1對(duì)成骨細(xì)胞MC3T3-E1增殖分化過程的調(diào)節(jié)作用.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:觀察成骨細(xì)胞不同生長(zhǎng)階段caveolin-1表達(dá)的時(shí)程變化,并研究caveolin-1對(duì)成骨細(xì)胞MC3T3-E1增殖和分化功能的影響。
　　 方法:MC3T3-E1細(xì)胞在含β-甘油磷酸鈉,抗壞血酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)18d,在細(xì)胞培養(yǎng)的不同時(shí)間(3,6,9,12,15,18 d),采用western blouing方法觀察caveolin-蛋白表達(dá)變化。采用經(jīng)western blotting法篩選并確證有效的RNA干擾質(zhì)粒pGe

2、nesil-1.1-cav-1質(zhì)粒下調(diào)caveolin-1表達(dá)后,觀察其對(duì)成骨細(xì)胞MC3T3-E1增殖和分化作用的影響:轉(zhuǎn)染后第3天測(cè)定細(xì)胞存活率(MTT法),分別在轉(zhuǎn)染后第3,6,9,12,15d測(cè)定細(xì)胞裂解液ALP活性(PNPP法)、培養(yǎng)上清骨鈣素濃度(ELISA)。
　　 結(jié)果:caveolin-1蛋白隨MC3T3-E1細(xì)胞的分化,表達(dá)量逐漸降低(P<0.01)各處理組對(duì)增殖期MC3T3-E1細(xì)胞存活率無(wú)明顯影響(P>0.

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