重金屬污染生物標志物-金屬硫蛋白檢測新方法及其應用.pdf

1、金屬硫蛋白（Metallothioneins，MTs）富含半胱氨酸，是一類低分子量、易被金屬誘導的特異蛋白質。它是一種重金屬污染暴露生物標志物，生物學功能非常廣，涉及必需金屬元素的貯存、解除重金屬的毒性、清除自由基等，已成為當今研究的熱門課題。目前尚無檢測MTs的標準方法，而現(xiàn)有檢測方法存在操作復雜繁瑣，儀器設備要求高，難于推廣應用等缺點。因此，研究準確快速檢測MTs的新方法具有重要意義。 本文用共振光散射技術建立了檢測MTs的

2、三種新方法： 1. 研究了MTs-AR-SDBS體系，建立了茜素紅共振光散射法檢測MTs的新方法。在pH2.5 BR緩沖溶液中及十二烷基苯磺酸鈉存在下，體系的共振光散射強度隨著MTs的加入在505nm處急劇增強，且增強的強度與MTs加入量成線性關系，線性范圍為0.0600~16.5 μg/ml，相關系數(shù)為0.9994，檢出限為19.05ng/ml，平均加標回收率為88.9％。方法簡便、靈敏、選擇性好，已用于實際樣品中MTs的檢測

3、，結果滿意。 2. 研究了MTs-Hg(II)-KI-PVA-XO體系，用共振光散射技術建立了檢測MTs的新方法。在pH2.5的緩沖溶液中，非離子表面活性劑聚乙烯醇-124存在下，體系在505nm處共振光散射增強最大，且共振光散射增強的強度與MTs的加入量成線性關系，檢出限21.58ng/ml，線性范圍0.072~6.3μg/ml，相關系數(shù)0.9949，相對標準偏差3.67％~5.61％, 平均回收率91.0％ (n=6)。該方

4、法用于加標樣品測定，結果滿意。 3. 研究了MTs-LGSF體系的共振光散射光譜，建立了LGSF RLS增強定量檢測尿樣中MTs的分析方法。在pH2.5 BR 緩沖溶液中及468nm波長處， MTs-LGSF體系的RLS增強值(ΔI)與MTs的濃度(CMTs)有良好的線性關系。線性范圍0.052~5.0μg/ml，相關系數(shù)0.9992，方法檢出限15.50 ng/ml, 相對標準偏差1.01％～5.15％（n＝9），平均加標回收