沉淀反應在動物檢驗檢疫中的應用

1、沉淀反應在動物檢驗檢疫中的應用沉淀反應在動物檢驗檢疫中的應用可溶性抗原與抗體結合，在兩者比例合適時，可形成較大的不溶性免疫復合物。在反應體系中出現(xiàn)不透明的沉淀物，這種抗原抗體反應稱為沉淀反應(precipitionreaction)。沉淀反應多用半固體瓊脂凝膠作為介質進行瓊脂擴散或免疫擴散。即可溶性抗原與抗體在凝膠中擴散，在比例合適處相遇時形成可見的白色沉淀。(1)單向免疫擴散(singleimmunodiffusion)單向免疫擴散試

2、驗是在凝膠中進行的沉淀反應。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當位置上打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復合物。當復合物體積增加到一定程度時停止擴散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度呈正相關。取已知量抗原繪制標準曲線，可根據所形成沉淀環(huán)的直徑，從標準曲線中查出待檢標本的抗原含量。本方法簡便，易于觀察結果，可測定抗原的靈

3、敏度(最低濃度)約為1020ug／ml。(2)雙向免疫擴散(doubleimmunodiffusion)將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，二者自由向四周擴散，在相遇處形成沉淀線。若反應體系中含兩種以上抗原抗體系統(tǒng)，則小孔間可出現(xiàn)兩條以上沉淀線。本法常用于抗原或抗體的定性檢測、組成和兩種抗原的相關性分析。(3)免疫電泳(immunoelectrophesis)先將待檢血清標本作瓊脂凝膠電泳，血清中各蛋白組分被分為不同區(qū)帶，然后按電泳方

4、向平行挖一小槽，加入相應抗血清，與已分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴散，在各區(qū)帶相應位置形成沉淀弧。對照正常血清形成的沉淀弧數量、位置和形態(tài)，可分析標本中所含抗原成分的性質和含量。(4)免疫比濁(immunonephelometry)當抗體濃度高，加入少量可溶性抗原，即可形成一些肉眼看不見的小免疫復合物，它可使通過液體的光束發(fā)生散射，隨著加入的抗原增多，形成的免疫復合物也增多，光散射現(xiàn)象也相應加強。免疫比濁法(immunonephel

5、omytry)就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經過一段時間，用光散射濁度計(nephelometry)測量反應液體的濁度，來推算樣品中的抗原含量。本法敏感、快速簡便，可取代單向擴散法定量測定免疫球蛋白的濃度。沉淀反應在動物檢驗檢疫中的應用沉淀反應在動物檢驗檢疫中的應用可溶性抗原與抗體結合，在兩者比例合適時，可形成較大的不溶性免疫復合物。在反應體系中出現(xiàn)不透明的沉淀物，這種抗原抗體反應稱為沉淀反應(precipitionrea

6、ction)。沉淀反應多用半固體瓊脂凝膠作為介質進行瓊脂擴散或免疫擴散。即可溶性抗原與抗體在凝膠中擴散，在比例合適處相遇時形成可見的白色沉淀。(1)單向免疫擴散(singleimmunodiffusion)單向免疫擴散試驗是在凝膠中進行的沉淀反應。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當位置上打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復合物。當復合物體積增

7、加到一定程度時停止擴散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度呈正相關。取已知量抗原繪制標準曲線，可根據所形成沉淀環(huán)的直徑，從標準曲線中查出待檢標本的抗原含量。本方法簡便，易于觀察結果，可測定抗原的靈敏度(最低濃度)約為1020ug／ml。(2)雙向免疫擴散(doubleimmunodiffusion)將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，二者自由向四周擴散，在相遇處形成沉淀線。若反應體系中含兩種以上抗原抗體系統(tǒng)，則

8、小孔間可出現(xiàn)兩條以上沉淀線。本法常用于抗原或抗體的定性檢測、組成和兩種抗原的相關性分析。(3)免疫電泳(immunoelectrophesis)先將待檢血清標本作瓊脂凝膠電泳，血清中各蛋白組分被分為不同區(qū)帶，然后按電泳方向平行挖一小槽，加入相應抗血清，與已分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴散，在各區(qū)帶相應位置形成沉淀弧。對照正常血清形成的沉淀弧數量、位置和形態(tài)，可分析標本中所含抗原成分的性質和含量。(4)免疫比濁(immunonephe

9、lometry)當抗體濃度高，加入少量可溶性抗原，即可形成一些肉眼看不見的小免疫復合物，它可使通過液體的光束發(fā)生散射，隨著加入的抗原增多，形成的免疫復合物也增多，光散射現(xiàn)象也相應加強。免疫比濁法(immunonephelomytry)就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經過一段時間，用光散射濁度計(nephelometry)測量反應液體的濁度，來推算樣品中的抗原含量。本法敏感、快速簡便，可取代單向擴散法定量測定免疫球蛋白的濃度。