分子診斷及基因檢測的臨床應用

1、分子診斷及基因檢測在臨床中應用的進展,,文獻檢索及學術趨勢,檢索策略：查詢2012-2018年間，以“gene diagnostic” or “molecular diagnostic”為關鍵詞；主要查找遺傳學領域文獻和腫瘤學領域的文獻，發(fā)表文獻量較大，在兩個領域中均有廣泛應用,,,,,,,,,,過去 – 宏觀水平檢測,檢測只是判斷有無疾病,根據(jù)部位和改變程度診斷疾病,實驗室診斷技術的進步,今天 – 分子水平檢測,根據(jù)細胞生物

2、學或DNA診斷疾病,檢測可區(qū)分疾病類別預測特定治療結(jié)果預測不良反應監(jiān)測疾病進展,明天 – 預測性檢測,多技術平臺，更高精確度多因素分析常見和復雜疾病多基因信息作為疾病診斷標準,新的檢測標本:尿、唾液、呼吸氣、其他更多應用診斷性影像學,,,,,,生化-細胞-染色體-CNV-STR-SNP水平上,分子診斷及基因診斷在遺傳學中的應用進展分子診斷及基因診斷在腫瘤學中的應用進展,,基于分子診斷的遺傳學應用遺傳疾病

3、風險篩查?查出孟德爾疾病致病基因,?早期疾病預測?孕前/胚胎植入前篩查,藥物基因組學?風險分層,?藥物效應和劑量?不良反應預測 常見疾病風險?風險預測?風險分層?查出早期的行為異常風險顯現(xiàn),2024/1/22,,7,遺傳學疾病的篩查應用,2024/1/22,,8,1、間期熒光原位雜交,iFISH,8,,,,Only 24h,,,,2024/1/22,,9,2、Q-PCR熒光定量PCR,熒光標

4、記的引物擴增STR片段，然后經(jīng)毛細管電泳檢測擴增的峰型來判斷擴增位點倍性。,2024/1/22,,10,3、MLPA 多重連接探針擴增,如果檢測的靶序列發(fā)生點突變或缺失、擴增突變，那么相應探針的擴增峰便會缺失、降低或增加，因此，根據(jù)擴增峰的改變就可判斷靶序列是否有拷貝數(shù)的異?；螯c突變存在。,,,,2024/1/22,,11,4、High-throughput sequencing（二代測序-非侵入產(chǎn)前診斷）,胎兒,2024/1/22,,

5、12,5、Array-CGH,2024/1/22,,13,攜帶不同熒光的待測樣本和對照樣本競爭性地與液相磁珠上的21chr BAC進行雜交，再檢測熒光強度評價待測樣本劑量，同aCGH！,6、BOBs液相芯片,分子診斷技術的發(fā)展——診斷精準程度的發(fā)展,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,發(fā)病易感遺傳缺陷,早期查出,針對性預防疾病發(fā)展,預測對藥物的可能反應,監(jiān)測藥物反應和發(fā)病反復,健康狀態(tài),無癥狀疾病狀態(tài),慢

6、病治療,有癥狀疾病狀態(tài),個體化醫(yī)學當今醫(yī)療保健重點,病人分層 / 治療未來醫(yī)療保健重點個體化藥物治療,疾病基因組學,藥物基因組學,遺傳學疾病的治療應用——個體化治療,,,,,,,,?,均有哮喘急性發(fā)作,受體遺傳變異引起療效和安全性個體差異哮喘發(fā)作終止,均吸入?2腎上腺素受體激動藥沙丁胺醇(Albuterol)沙美特羅 (Salmeterol)死亡

7、?2腎上腺素受體基因變異 (Arg/Arg16),,,,,人數(shù),藥物代謝酶遺傳變異引起療效和毒性個體差異,使用相同劑量后體內(nèi)藥物總量,酶活性過高,酶活性適中,酶活性過低,無效,毒性,血內(nèi)藥物濃度,疾病相關基因疾病預測與診斷,藥物作用相關基因個體化藥物治療,罕見孟德爾遺傳病致病基因,常見復雜疾病易感基因,藥物代謝/作用基因,藥物代謝/作用SNPs,疾病預測-對疾病的新認識和控制,個體化用藥-

8、最佳藥物反應,倫理、法律、社會問題,分子診斷是實施優(yōu)生優(yōu)育及個體化治療的必備技術 基因檢測,分子診斷及基因診斷在遺傳學中的應用進展分子診斷及基因診斷在腫瘤學中的應用進展,,基因與腫瘤細胞生物學各個方面均有關,,,,分子診斷在腫瘤學應用的主要技術,診斷,預后評估,判定治療效果,內(nèi)容,基因突變,基因表達,,有無,類型,位置,效應,,,,,有無,水平,效應,

9、,,臨床應用,檢測技術,PCR,基因測序,蛋白芯片,核酸雜交,免疫化學,,,,,樣本,內(nèi)容,與遺傳有關的基因突變,檢測技術,PCR,基因測序,蛋白芯片,基因測序,免疫化學,血液,腫瘤組織,血漿DNA變化,血漿變中癌基因表達檢測,,,,腫瘤標志物的檢測,,腫瘤細胞的基因突變,腫瘤細胞的基因表達,腫瘤細胞的蛋白表達,,,,PCR,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,BRA

10、CAnalysis®Campath® (坎帕斯 )CD52人源化單克隆抗體Herceptin® (赫賽汀)Camptosar® (伊立替康 )Gleevec®(格列衛(wèi))Oncotype DX®,乳腺癌判斷病情慢性淋巴細胞性白血病選藥乳腺癌

11、確定劑量結(jié)腸直腸癌判斷藥物療效慢性髓細胞性白血病復發(fā)風險乳腺癌,基因測序, 風險分析輕微后遺癥HER2基因表達UGT1A1多態(tài)性分析BCR-ABL熒光定量多變量分析,分子診斷在腫瘤學的臨床應用分類及舉例 疾病易感,,,,,,,,,,,,,,,,發(fā)現(xiàn)