茄子萼片花青素合成相關(guān)基因DFR和MYB的克隆及表達(dá)分析.pdf

1、茄子（Solanum melongena L.）作為大眾餐桌上即為常見(jiàn)的菜，其富含大量花青素，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其根、莖、葉和種子具有一定藥用價(jià)值，其萼片也經(jīng)常出現(xiàn)在餐桌上，具有很好的市場(chǎng)前景。
　　本研究針對(duì)于歐洲綠萼茄，東北紫茄，及其兩種茄子的雜交茄觀察后發(fā)現(xiàn)，歐洲進(jìn)口茄萼片整個(gè)生長(zhǎng)周期內(nèi)均為綠色，東北紫茄則隨生長(zhǎng)周期的推進(jìn)，逐漸變?yōu)檩嗥?，而雜交品種則隨生長(zhǎng)周期，萼片也逐漸變紫，但并非全為紫色，而是紫、綠相間。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)

2、萼片為何會(huì)出現(xiàn)該種變化進(jìn)行了如下研究及結(jié)果分析:
　　1.選擇三種茄子生長(zhǎng)成熟的果實(shí)萼片作為實(shí)驗(yàn)材料。分別為全綠的歐洲綠萼品種茄子，東北紫萼品種茄子，及其綠、紫相間的雜交品種。采用RACE及同源克隆的方法分別克隆了這三個(gè)品種茄子DFR及MYB6個(gè)基因的cDNA，命名為SmDFR和SmMYB。
　　2.DFR和MYB基因分析
　　歐洲綠萼SmDFR基因cDNA全長(zhǎng)1016bp，從82bp-716bp為開(kāi)放閱讀框，編碼21

3、3個(gè)氨基酸，登錄號(hào)為KX224250;東北紫萼SmDFR基因cDNA全長(zhǎng)1128bp，從332bp-973bp為開(kāi)放閱讀框，共213個(gè)氨基酸，登錄號(hào)為KX224251;雜交品種SmDFR基因cDNA全長(zhǎng)1005bp，從73bp-708bp為開(kāi)放閱讀框，共211個(gè)氨基酸，登錄號(hào)為KX224252。歐洲綠萼SmMYB基因cDNA全長(zhǎng)969bp，從116bp-578bp為開(kāi)放閱讀框，共編碼153個(gè)氨基酸，登錄號(hào)為KX224253;東北紫萼Sm

4、MYB基因cDNA全長(zhǎng)959bp，從178bp-621bp為開(kāi)放閱讀框，編碼153個(gè)氨基酸，登錄號(hào)為KX224254;雜交品種SmMYB基因cDNA全長(zhǎng)993bp，從140bp-582bp為開(kāi)放閱讀框，編碼153個(gè)氨基酸，登錄號(hào)為KX224255。
　　3.采集萼片，對(duì)三個(gè)品種現(xiàn)蕾期、盛蕾期、初花期，盛花期4個(gè)時(shí)期的花青素含量進(jìn)行測(cè)定。檢測(cè)結(jié)果表明，歐洲綠萼品種花青素含量無(wú)明顯變化;而東北紫萼則隨生長(zhǎng)周期推進(jìn)，花青素含量明顯升高;

5、雜交品種的花青素含量則處于上述二者之間，與觀察到的萼片紫色變化程度成正相關(guān)，但又并非完全符合肉眼觀察的顏色變化，其中可能與pH值等諸多因素有關(guān)。熒光定量PCR結(jié)果表明，DFR及MYB的表達(dá)水平變化與其花青素含量正相關(guān)。
　　證實(shí)三個(gè)品種中萼片顏色及花青素含量變化與DFR及MYB的表達(dá)模式及表達(dá)量成正相關(guān)。但由于前期試驗(yàn)所得結(jié)果，所得氨基酸比對(duì)差異并不大，而表達(dá)量差異則有明顯異，故推斷可能與該基因的啟動(dòng)子有關(guān)，調(diào)控這些基因呈現(xiàn)出該種