圍產(chǎn)期奶牛血清蛋白質(zhì)組學(xué)的初步研究.pdf

1、本研究目的是對(duì)圍產(chǎn)期奶牛血清中蛋白質(zhì)組的變化進(jìn)行初步探索，共包括以下三部分：
　　 第一部分：通過ELISA方法對(duì)圍產(chǎn)期奶牛血清中免疫蛋白的變化進(jìn)行研究。采集36頭中國(guó)荷斯坦奶牛，分為臨床健康奶牛組(n=26)和高體細(xì)胞數(shù)奶牛組(n=10)。利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，檢測(cè)圍產(chǎn)期奶牛血清中免疫球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白和白蛋白的變化規(guī)律。試驗(yàn)結(jié)果表明：臨床健康奶牛血清中IgM濃度在分娩前后無顯著變化，高體細(xì)胞數(shù)奶牛血清中IgM濃度顯著高于臨床健

2、康奶牛(P=0.03)；臨床健康奶牛血清中IgG濃度在分娩后升高，高體細(xì)胞數(shù)奶牛血清中IgG濃度與臨床健康奶牛無顯著差異；臨床健康奶牛血清中IgA濃度在分娩前后無顯著變化，分娩后第7天和第21天，高體細(xì)胞數(shù)奶牛IgA濃度顯著高于臨床健康奶牛(P=0.03；P=0.04)；臨床健康奶牛血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度臨近分娩呈升高趨勢(shì)，分娩后降低，高體細(xì)胞數(shù)奶牛血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度與臨床健康奶牛無顯著差異；臨床健康奶牛血清中白蛋白濃度在分娩前后無顯著變化

3、，高體細(xì)胞數(shù)奶牛分娩前白蛋白濃度高于分娩后。奶牛臨近分娩和分娩后血清中免疫球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白和白蛋白的變化與圍產(chǎn)期免疫功能下降有關(guān)。
　　 第二部分：采用肽文庫試劑盒ProteoMiner富集荷斯坦奶牛的血清，運(yùn)用二維凝膠電泳結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法，分析富集前后血清蛋白的變化。結(jié)果表明，牛血清經(jīng)ProteoMiner試劑盒富集，白蛋白含量顯著下調(diào)(血清的差異顯著水平P=0.01)，載脂蛋白E顯著增加(血清的差異顯著水平為P=0.

4、01)。該法在降低牛血清中高豐度蛋白的同時(shí)有效富集了低豐度蛋白，有利于血清中低豐度蛋白質(zhì)組的研究。
　　 第三部分：通過定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)圍產(chǎn)期奶牛血清中蛋白質(zhì)含量的變化進(jìn)行研究。采集8頭中國(guó)荷斯坦奶牛，分別采集產(chǎn)前21d、產(chǎn)后1d的血清樣品，經(jīng)ProteoMiner試劑盒富集后的血清蛋白采用同位素相對(duì)標(biāo)記與絕對(duì)定量技術(shù)標(biāo)記，串聯(lián)質(zhì)譜鑒定。試驗(yàn)結(jié)果表明：共鑒定78個(gè)血清蛋白，其中，結(jié)合珠蛋白、脂多糖結(jié)合蛋白等19個(gè)蛋白在分娩后