鼻咽癌裸鼠模型血清蛋白質(zhì)組學的研究.pdf

1、中南大學碩士學位論文鼻咽癌裸鼠模型血清蛋白質(zhì)組學的研究姓名：吳麗莎申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：姚開泰20060501碩士學位論文中文摘要瘤細胞本身的生長分化，也可以通過機體的循環(huán)系統(tǒng)改變整體的內(nèi)環(huán)境，最終導致腫瘤的無限增殖和遠處轉(zhuǎn)移。從腫瘤細胞中釋放入血的這些蛋白質(zhì)，被認為是一類腫瘤標志物的候選分子因此，本實驗的目的在于，利用蛋白質(zhì)組學技術，對NPC細胞培養(yǎng)上清液及NPC裸鼠模型血清進行研究，尋找與NPC相關的血

2、清標志物。研究方法本實驗運用蛋白質(zhì)組學相關技術方法開展課題研究。1運用細胞裂解的方法提取鼻咽癌細胞株58F和610B總蛋白質(zhì)，通過試驗不同裂解液成份，調(diào)整2DE等點聚焦參數(shù)的設置，比較不同pI范圍IPG膠條實驗結(jié)果，對鼻咽癌細胞株進行蛋白質(zhì)組學研究。2利用無血清培養(yǎng)基對58F，610B細胞進行培養(yǎng)，收集腫瘤細胞培養(yǎng)上清液，以25％三氯醋酸(TCA)沉淀上清液總蛋白，隨后以含o007％8巰基乙醇丙酮洗滌沉淀的方法進行蛋白質(zhì)的濃縮和純化。加

3、入適量裂解液結(jié)合超聲粉碎，得到適用于2DE的腫瘤細胞培養(yǎng)上清蛋白質(zhì)樣品，進行相應蛋白質(zhì)組學研究。3收集58F；6IOB原位種植成功的NPC裸鼠模型血清及對照組同年齡，同性別未致瘤裸鼠血清樣本，采用不同分組類型的蛋白質(zhì)樣本進行混合的策略，在不同的pI范圍的IPG膠條(pH310NE，pH47)下進行2DE，利用ImageMaster50分析軟件以對照組血清2DE圖譜作為參考，對58F，610B血清2DE圖譜進行差異分析，最終進行差異蛋白質(zhì)

4、的質(zhì)譜鑒定。研究結(jié)果本研究利用以建成的鼻咽癌裸鼠模型血清作為實驗樣本，結(jié)合鼻咽癌細胞株培養(yǎng)上清液蛋白質(zhì)組學研究結(jié)果，探索鼻咽癌相關的血清蛋白質(zhì)改變情況，為尋找NPC相關的血清標志物提供可能的線索。本課題進行了如下工作：1利用雙向凝膠電泳技術，通過對鼻咽癌細胞株58F和610B的實驗，穩(wěn)定和優(yōu)化了蛋白質(zhì)提取方法及等電聚焦中的各種條件，建立了分辨率高重復性好的2DE圖譜。2對5—8F，61013鼻咽癌細胞培養(yǎng)上清液進行蛋白質(zhì)組的研究，比較分