延伸蛋白2基因在仿刺參再生過(guò)程中的表達(dá)分析.pdf

1、分類(lèi)號(hào)：密級(jí)：學(xué)校代碼：學(xué)號(hào)：遣掌師耗大學(xué)10165201111206碩士學(xué)位論文延伸蛋白2基因在仿刺參再生過(guò)程中的表達(dá)分析作者姓名：學(xué)科、專(zhuān)業(yè)：研究方向：導(dǎo)師姓名：梅艷麗細(xì)胞生物學(xué)海洋動(dòng)物細(xì)胞生物學(xué)侯林教授2014年5月延伸蛋白2基因在仿刺參再生過(guò)程中的表達(dá)分析摘要延伸體(elongator)是由ELPl3核心亞體復(fù)合物和ELP46較小亞體復(fù)合物構(gòu)成的一個(gè)多蛋白復(fù)合物。在酵母和人類(lèi)中，延伸體蛋白復(fù)合物具有高度的保守性。它參與RNA聚合

2、酶Ⅱ介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄延伸、tRNA修飾、細(xì)胞分裂、細(xì)胞骨架構(gòu)建等許多細(xì)胞調(diào)控過(guò)程，在其調(diào)控過(guò)程中起到重要作用。延伸蛋白2(ELP2)是延伸體蛋白復(fù)合物中的一員，因此在生物體中也參與著重要的生理過(guò)程，對(duì)于生物體的生長(zhǎng)和發(fā)育起著不容忽視的重要作用。本文首次采用基因克隆(RACE)技術(shù)獲得了仿刺參延伸蛋白2(Ajelp2)基因的全長(zhǎng)cDNA序列，該全長(zhǎng)序列包含3058bp堿基對(duì)，包括54bp5’端非編碼區(qū)，526bp3’端非編碼區(qū)和一個(gè)2478bp

3、的開(kāi)放閱讀框編碼825個(gè)氨基酸。該序列的分子量是916kDa和等電點(diǎn)為584。通過(guò)與其他物種的序列進(jìn)行比對(duì)發(fā)現(xiàn)，Ajetp2基因序列具有較高的保守性。通過(guò)原位雜交技術(shù)分析了Ajetp2基因在仿刺參不同組織中的表達(dá)部位，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Ajetp2基因在仿刺參的各組織中均有表達(dá)，尤其是在體壁和腸中的表達(dá)較強(qiáng)。為了檢測(cè)Ajelp2基因在仿刺參的不同組織的不同再生階段的表達(dá)量，我們使用了RealTimePCR技術(shù)進(jìn)行了檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Aje勿

4、2基因在腸和呼吸樹(shù)中的表達(dá)趨勢(shì)相似，都是隨著組織的再生Ajetp2基因的表達(dá)量也逐漸上調(diào)，并且在15d時(shí)表達(dá)量最高，隨著組織恢復(fù)到正常大小，該基因的表達(dá)量也逐漸下調(diào)，最后恢復(fù)到正常水平。在體壁組織中，在再生的早期階段Ajetp2基因表達(dá)量出現(xiàn)短暫且明顯的上調(diào)趨勢(shì)，隨后表達(dá)量下調(diào)，在50min又出現(xiàn)明顯的上調(diào)。在體壁再生的后期階段，隨著組織的再生，彳jetp2基因表達(dá)量逐漸上調(diào)，最后恢復(fù)到正常水平。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析表明Ajetp2基因在