銀杏雌雄花芽差異表達基因的分析和性別相關基因的鑒定.pdf

1、銀杏(Ginkgo biloba L.)系第四季冰川之后惟一在中國保存下來的一孑遺種子植物，在學術界一向稱其為“活化石”。銀杏是重要的經(jīng)濟和觀賞樹種，其雌株和雄株往往具有不同的經(jīng)濟價值。雄株是常用的用材或綠化觀賞樹；而雌株因為果實有難聞氣味、落果腐爛造成污染等原因，不適合作為綠化樹，但生產(chǎn)白果則需要大量雌株。性別鑒定尤其是早期性別鑒定，對于銀杏生產(chǎn)的科學規(guī)劃和經(jīng)濟效益具有重要意義。
　　 本研究分別以銀杏的雌、雄花的花芽為研究試

2、材，通過抑制性差減雜交技術構建銀杏雌、雄花芽差減cDNA文庫，并鑒定了48個雌、雄花芽特異表達序列，通過序列比對對它們進行了功能注釋。主要研究結果如下：
　　 1.分別建立了銀杏雌、雄花芽差減cDNA文庫，通過菌落PCR，對差減文庫進行差異篩選，篩選得到差異表達序列大小在300-1200bp之間，并成功測序48條。
　　 2.應用BLAST軟件將差減文庫篩選到的特異基因ESTs片段序列與Genbank中序列進行同源性比對

3、，同時運用KEGG代謝途徑數(shù)據(jù)庫和COG功能分類對序列進行了初步的生物信息學分析。將所得ESTs按照生物學功能分類可分為：能量產(chǎn)生與代謝、光合作用及葉綠體基因、轉錄調(diào)控、信號轉導與代謝、蛋白質(zhì)代謝、減數(shù)分裂、次生代謝產(chǎn)物生物合成和發(fā)育，共8個大類。
　　 3.通過功能分析得到，銀杏雌花中有參與光合作用的葉綠體基因，而雄花未發(fā)現(xiàn)此基因，這與銀杏雌花發(fā)育過程中呈現(xiàn)深綠色，而雄花呈現(xiàn)嫩綠色是一致的，表明雌花比雄花發(fā)育速度快。雌花基因序

4、列中得到相對于雄花優(yōu)勢表達的轉錄調(diào)控相關基因，銀杏雌花發(fā)育過程相對于雄花更為復雜。
　　 4.在銀杏雄花的差異表達序列中發(fā)現(xiàn)異胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)基因，這是已被證實了的與植物性別決定相關的基因，可能參與銀杏雄性性別決定或雌花發(fā)育過程，這為銀杏性別決定機理研究及性別鑒定提供重要的理論基礎。
　　 5.由于銀杏特殊的進化學未知和參與銀杏花器官發(fā)育和性別決定的基因進化上出現(xiàn)較晚、進化較快