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文檔簡介
1、蓖麻(Ricinus communis L.)是一種含油量較高的油脂植物,蓖麻油含量大約在50%,主要以羥基酸類油脂為主。蓖麻油的合成代謝過程主要在蓖麻的胚乳形成期進行,蓖麻油酸12-羥化酶(oleate 12-hydroxylase,FAH12)是整個代謝中的關鍵酶。該酶在蓖麻的胚乳中高效表達,而在莖葉根等器官組織中表達較少。因此,FAH12基因的啟動子具有高效的組織特異性啟動基因效果。以此構建的特異性表達載體將在蓖麻胚乳中高效的表達
2、外源基因,這既保證了外源基因在植物體內的有效發(fā)揮,又減少了對植物的不良影響。
本研究以蓖麻通蓖5號飽滿籽實為材料,運用基因克隆技術,克隆蓖麻FAH12特異型啟動子,以雙元表達載體pCAMBIA1305.2為基礎,構建由FAH12啟動子調控的植物組織特異性表達載體pCAM5.2-FA,為下一步建立蓖麻高效遺傳轉化體系奠定實驗基礎。本實驗的主要研究結果如下:
經生物信息學分析顯示,FAH12基因上游序列中含有多個順式作用
3、元件,包括6個與光響應元件(AF-1結合位點、G-Box、GT-1);22個標準啟動子調控元件CAAT-Box;4個胚乳表達相關元件Skn-1模塊;1個增強子TATA重復區(qū);14個TATA核心啟動元件;1個與水楊酸相應相關的TCA序列區(qū)。從生物信息學角度證實該啟動子序列具有的啟動所取的啟動元件。
本研究結果表明,FAH12上游序列能夠作為引導外源基因特異性表達的啟動子。特異性表達載體的成功構建對目的基因在蓖麻籽中高效有序地表達
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