日糧不同營養(yǎng)水平對絨山羊機體代謝及腸道營養(yǎng)物質感應的影響.pdf

1、本試驗通過Ussing Chamber技術、熒光定量PCR和Western blot方法分別測定腸道電生理學參數(shù)變化、腸道感應因子mRNA相對表達量和腸道m(xù)TOR通路的變化，旨在研究適當降低日糧蛋白水平，并增加過瘤胃葡萄糖和添加NCG對絨山羊機體代謝及腸道營養(yǎng)物質感應的影響。整體試驗結果顯示，適宜降低日糧蛋白水平對機體代謝無顯著影響，但是增加適量的過瘤胃葡萄糖(20g/d)并添加NCG后對絨山羊機體代謝及腸道營養(yǎng)物質感應均有促進作用，為

2、日糧中蛋白（氨基酸）和葡萄糖對機體互作效應提供理論基礎，促進碳水化合物和功能性氨基酸對日糧的調控技術研究層次從單一化向多方位快速轉換，同時也為精確配制日糧，節(jié)約日糧成本，減少對環(huán)境污染提供新思路。本試驗由以下5個部分組成:
　　試驗1不同蛋白水平日糧中過瘤胃淀粉量的測定、十二指腸所灌注葡萄糖量的確定及其對絨山羊機體代謝的影響
　　選用27只體況良好，體重為50.07±5.97有永久性瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的內蒙古白絨山羊半同

3、胞羯羊，按體重隨機分為3組:低氮組(CP:10.5％)、低氮+NCG組和高氮組(CP:13.5％)，結果表明:淀粉的攝入量隨著日糧中蛋白水平的降低而增加，且低氮組和低氮+NCG組全消化道的淀粉消化率顯著高于中氮組;并根據(jù)王玲，任瑩、韓非等測定的過瘤胃葡萄糖量來進行計算該3種日糧的過瘤胃葡萄糖量，并確定十二指腸葡萄糖的灌注量為0、20和40g/d。進一步研究結果:基礎日糧條件下，微生物蛋白合成量隨著日糧蛋白水平的降低而下降，低氮和低氮+N

4、CG組沉積氮含量顯著高于高氮組;在低氮日糧水平下增加過瘤胃葡萄糖的量有助于絨山羊氮的沉積，而灌注的量以不超過20g/d為宜;在此基礎上添加NCG后的日糧對絨山羊氮代謝的促進作用更為明顯。
　　試驗2日糧不同處理對絨山羊小腸電生理學指標的影響
　　試驗分組及飼養(yǎng)管理同試驗1。飼養(yǎng)試驗結束后，每個試驗組隨機選取一只羊進行屠宰。屠宰后，取近空腸中段約10cm，用溫生理鹽水沖洗干凈后，迅速將空腸分為長度約2cm的腸段，利用Ussin

5、g Chamber技術來測定各試驗組電生理學參數(shù)的變化。結果表明:絨山羊空腸組織的短路電流和組織導電性隨著日糧蛋白水平降低而增加（降低日糧蛋白水平促進小腸對葡萄糖的轉運能力），低氮飼喂條件下，增加過瘤胃葡萄糖并添加NCG后促進絨山羊小腸葡萄糖轉運能力。
　　試驗3日糧不同處理對絨山羊小腸mTOR信號通路的影響
　　試驗羊只在飼養(yǎng)試驗結束后進行屠宰，分別采空腸和十二指腸樣品。通過Westernblot來測定不同日糧蛋白、葡萄糖

6、水平及加NCG對絨山羊小腸mTOR信號靶分子4E-BP1和p70S6K磷酸化的進行測定。結果顯示，基礎日糧條件下，降低日糧中蛋白水平將抑制mTOR下游分子的磷酸化，而適當?shù)奶砑覰CG和增加過瘤胃葡萄糖后能夠有所改善。
　　試驗4日糧不同處理對絨山羊小腸SGLT1、GLUT2、SLC7A1、SLC7A9、T1R1、T1R2、T1R3 mRNA相對表達量、血液理化指標和相關激素含量的影響
　　試驗羊只在飼養(yǎng)試驗結束時采集其血漿和

7、血清樣品，進行血漿理化指標和血清激素相關指標測定，屠宰后，分別采空腸和十二指腸樣品，用于分析不同日糧蛋白、葡萄糖水平及加NCG對絨山羊小腸中葡萄糖、氨基酸轉運載體及營養(yǎng)感應因子mRNA相對表達量的影響。結果表明:在基礎日糧條件下，隨著蛋白水平的下降，葡萄糖轉運載體SGLT1的mRNA表達量、血漿尿素氮和瓜氨酸含量、血糖濃度和胰島素水平、葡萄糖依賴型激素減少，而氨基酸轉運載體SLC7A9和SLC7A1的mRNA表達量增加;增加適宜過瘤胃葡

8、萄糖后，低氮組SGLT1和T1R1、T1R2、T1R3mRNA表達量與高氮組相比呈增加趨勢;且低氮+NCG組20g/dG組最佳;
　　試驗5不同NFC/NDF比例日糧對絨山羊小腸電生理學參數(shù)及mTOR信號通路的影響選用9只體況良好，體重為50.07±5.97有永久性瘤胃瘺管和十二指腸瘺管的內蒙古白絨山羊半同胞羯羊，按體重隨機分為3組:A組(CP:10.59％，NFC/NDF:1.02);B組(CP:10.59％，NFC/NDF:0

9、.81)和C組(CP:10.54％，NFC/NDF:0.83，添加0.2g/d NCG)，每組3只。測定其小腸GT、Isc及mTOR下游分子4E-BP1和p70S6K的磷酸化程度，結果表明:同一氮水平條件下，增加日糧的NFC/NDF比例，對小腸電生理學參數(shù)沒有顯著影響;對絨山羊空腸和十二指腸的mTOR下游分子4E-BP1和p70S6K的磷酸化程度增強;而NFC/NDF低比例組添加NCG后有效改善mTOR下游分子4E-BP1和p70S6K