尿酸輔助樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗乙肝病毒免疫效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文尿酸輔助樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗乙肝病毒免疫效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究姓名：馬曉軍申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（傳染病）指導(dǎo)教師：田德英20070429華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文24DC體外負(fù)載HBsAg，聯(lián)合尿酸接種正常BALBc小鼠。尾靜脈注射方式接種，DC接種數(shù)量為1106每只小鼠，每周接種一次，共兩次。分高、中、低劑量（分別為400μg、200μg、100μg）尿酸聯(lián)合HBsAgDC組、負(fù)載或未負(fù)載HBsAg的DC單獨(dú)接種組

2、、尿酸單獨(dú)接種組（200μg）及PBS對照組。同時(shí)以負(fù)載HBS2839的DC單獨(dú)或聯(lián)合尿酸免疫小鼠，作為平行對照觀察組。一周和兩周時(shí)，以體內(nèi)熒光測定CTL活性方法，用流式細(xì)胞儀檢測特異性CTL活性；免疫兩周時(shí)，取小鼠脾T淋巴細(xì)胞，CFSE染色，體外以HBsAg或HBS2839刺激培養(yǎng)72h后，流式細(xì)胞儀測定其增殖反應(yīng)；取小鼠脾淋巴細(xì)胞體外HBsAg或HBS2839刺激培養(yǎng)72h后，以ELISA法測定細(xì)胞上清IL4和IFN的分泌水平。結(jié)果

3、：1.通過鑒定體外成功誘導(dǎo)培養(yǎng)出DC。尿酸濃度為400μgml、200μgml、100μgml時(shí)能增強(qiáng)DC細(xì)胞表面CD83、CD86、IAIE分子表達(dá)率；提高IL12p70分泌水平（與陰性對照組相比，P＜0.05）；尿酸能增強(qiáng)DC刺激T細(xì)胞增殖能力（與陰性對照組相比，P值均小于0.05）；尿酸濃度為70μgml時(shí)，細(xì)胞表面分子表達(dá)、IL12p70分泌水平、刺激T細(xì)胞增殖作用與陰性對照組比較均無明顯差別（P＞0.05）。UA促進(jìn)DC成熟的

4、能力呈尿酸劑量依賴性增強(qiáng)。2.RTPCR結(jié)果示尿酸組與培養(yǎng)基對照組相比，TLRsmRNA表達(dá)出現(xiàn)明顯的變化。TLR2mRNA、TLR3mRNA、TLR4mRNA表達(dá)下降（P＜0.05），以TLR4mRNA下降最明顯；IL12p70表達(dá)顯著增高（P＜0.05）；與LPS組相比，TLRsmRNA與IL12p70mRNA表達(dá)水平相似，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。3.（1）免疫印跡示，尿酸刺激后，15min時(shí)，pp38、pERK12、pJNK、