轉(zhuǎn)Btcry1Ah基因抗蟲(chóng)玉米的遺傳穩(wěn)定性分析及農(nóng)藝性狀觀察.pdf

1、在前期工作中，將Bt cry1Ah基因轉(zhuǎn)入玉米自交系綜31中，選取其中一株對(duì)亞洲玉米螟有顯著抗性的玉米植株，命名為 HGK60。分別從DNA水平和轉(zhuǎn)錄翻譯水平對(duì) HGK60事件的T4代和T5代植株進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性分析。通過(guò) PCR、Tail-PCR、Southern Blot分析表明外源基因整合到了玉米基因組中并可以穩(wěn)定遺傳給后代，且明確了外源基因是按單插入雙拷貝的方式插入到玉米1號(hào)染色體上，分析得到了玉米插入序列的側(cè)翼序列。通過(guò) RT-

2、PCR、Western Blot、ELISA、試紙條分析表明外源基因可以在玉米的根、莖、葉等組織中正常高效表達(dá)。
　　在室內(nèi)和田間分別用亞洲玉米螟、棉鈴蟲(chóng)和黏蟲(chóng)幼蟲(chóng)對(duì) HGK60玉米的殺蟲(chóng)效果進(jìn)行檢測(cè)。室內(nèi)生物活性檢測(cè)結(jié)果表明，取食 HGK60玉米心葉的亞洲玉米螟幼蟲(chóng)在3天后死亡率達(dá)100％；HGK60玉米對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)有毒殺作用，玉米不同部位對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)效果存在差異；與綜31相比，取食 HGK60玉米葉片一周后的黏蟲(chóng)幼蟲(chóng)體重

3、增長(zhǎng)明顯受到抑制。田間生物活性檢測(cè)結(jié)果表明，HGK60玉米對(duì)于亞洲玉米螟和棉鈴蟲(chóng)有很強(qiáng)的殺蟲(chóng)活性，達(dá)到高抗級(jí)別，對(duì)于黏蟲(chóng)有一定的殺蟲(chóng)活性，為抗性級(jí)別。
　　對(duì)HGK60與鄭58自交系回交轉(zhuǎn)育5代后的轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行農(nóng)藝性狀分析。在無(wú)蟲(chóng)害情況下，與鄭58相比，HGK60的株高、穗位高、穗粗、穗長(zhǎng)等差異不顯著；在人工模擬蟲(chóng)害爆發(fā)的的情況下，鄭58的生長(zhǎng)發(fā)育受到影響，千粒重和單株產(chǎn)量都顯著低于HGK60。
　　以上研究表明，HGK6