復方中藥預防非酒精性脂肪性肝纖維化的實驗研究.pdf

1、目的：非酒精性脂肪性肝病的患病率日趨升高，其疾病譜包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化和脂肪性肝硬化。我們在前期實驗中已經(jīng)證實復方中藥益腎軟堅煎能夠有效的治療脂肪肝和高脂血癥，并改善肝功能。本實驗旨在前期實驗的基礎上，建立非酒精性脂肪性肝纖維化大鼠模型，并繼續(xù)研究復方中藥軟肝煎對非酒精性脂肪性肝纖維化的預防作用及其機制。 方法：雄性SD大鼠38只，按體重分層隨機分為4組：正常組8只普通飼料飲食，其余各組分別為模型組14只

2、、低劑量組8只和高劑量組8只，均為高脂飼料飲食。飼養(yǎng)16周后隨機殺死模型組4只大鼠，確定脂肪肝模型成立且無異常纖維結締組織增生后，在原飼養(yǎng)方法基礎上對低劑量組和高劑量組行中藥灌胃，劑量分別為1.28g生藥/100g體重/日和2.56g生藥/100g體重/日；正常組和模型組以生理鹽水灌胃。治療12周后處死大鼠，稱取體重和肝濕重，取肝臟左葉置于10％福爾馬林中固定，石蠟切片進行HE和VanGiesson苦味酸酸性復紅染色，分別觀察脂肪變性、

3、炎癥和纖維化程度，免疫組化法觀察肝組織中TGF-β1的陽性表達；取血檢測生化指標TP、ALB、ALT、AST、TC，用放射免疫學方法測定血清中HA、LN、PCⅢ和CⅣ。 結果：模型組大鼠體重和肝濕重均明顯高于正常組、低劑量組和高劑量組并有顯著性差異(P＜0.05)，低劑量組體重和肝濕重高于正常組(P＜0.05)，高劑量組與正常組之間無顯著性差異(P＞0.05)。肝組織病理學結果示：模型組大鼠可見全小葉內(nèi)肝細胞脂肪變性伴較多炎細胞

4、浸潤及碎屑樣壞死；VG染色示中央靜脈周圍、竇周及匯管區(qū)內(nèi)纖維結締組織明顯增生，表明非酒精性脂肪性肝纖維化模型復制成功。兩預防組大鼠肝組織脂肪變性、炎細胞浸潤、壞死及纖維結締組織的增生均較模型組明顯減輕，尤以高劑量組更為顯著。血清學指標結果示：與正常組比較，模型組大鼠ALT、AST、TC、HA、LN、PCⅢ、CⅣ均明顯增高并有顯著性差異(P＜0.05)；與模型組比較，低劑量組和高劑量組均明顯降低有顯著性差異(P＜0.05)，其中高劑量組指

5、標略低于低劑量組但無顯著性差異(P＞0.05)。相關性分析示血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ與肝組織纖維化程度之間均存在正相關。肝組織TGF-β1的免疫組化測定結果：與正常組相比，模型組TGF-β1陽性表達增高并有顯著性差異(P＜0.05)，兩預防組與正常組之間無顯著性差異(P＞0.05)。與模型組比較，高劑量組陽性表達程度降低有顯著性差異(P＜0.05)，而低劑量組無顯著性差異(P＞0.05)。 結論： 我們成功復制了大鼠非酒精性