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文檔簡介
1、目的:
共軛亞油酸(Conjugated Linoleic Acid,CLA)干預大鼠骨折模型觀察對大鼠脛骨骨折愈合的影響,探討是否可以促進大鼠骨折愈合。
方法:
將體重200g左右的雌性Sprague-Dawley大鼠30只隨機分成2組,每組15只:CLA組(A);Control組(B),將各組大鼠制作左脛骨中段骨折模型; A組給予共軛亞油酸灌胃干預(10 g/Kg·diet),B組給予生理鹽水灌胃。在骨
2、折愈合第2周、第4周、第6周檢測堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP);行DR攝片并評分;在第4、6周給予Micro-CT掃描;于第6周過量麻醉后處死大鼠,取出脛骨標本行生物力學測試、骨痂組織HE染色觀察。通過血生化結果變化、影像學觀察對比、生物力學測試及組織學的微觀對比,評估兩組骨折愈合的變化和不同。
結果:
1、堿性磷酸酶(ALP)測定:骨折愈合第2、4、6周后 CLA組的血清ALP濃度均
3、高于Control組,且CLA組在2周時ALP濃度均明顯高于Control組(p=0.0126),具有統(tǒng)計學意義。骨折愈合第4周、6周CLA組血清ALP濃度均高于Control組,無統(tǒng)計學意義。
2、DR攝片并評分:骨折6周時CLA組的DR攝片評分明顯高于Control組(P<0.05)。骨折愈合第2周CLA組:1.08±0.16分;Control組:0.83±0.19分;骨折愈合第4周CLA組:3.66±0.33分;Cont
4、rol組:3.0±0.33分;骨折愈合第2、4周CLA組的平均分均明顯優(yōu)于Control組,無統(tǒng)計學意義。
3、Micro-CT分析:
?、貱T圖像對比分析:骨折愈合第4周CLA組與Control組骨皮質不連續(xù),內部骨小梁未全部形成連續(xù)性,骨折線清晰可見。骨折愈合第6周,CLA組骨皮質連續(xù)性存在,骨折斷端未見透亮影,近似正常骨結構;Control組骨折線模糊,皮質骨大部分連續(xù),仍可見不規(guī)則骨痂存在。
?、诠敲芏?/p>
5、(BMD)測定:在骨折愈合第6周,CLA組中大鼠脛骨骨折斷端ROI的BMD明顯高于Control組(P<0.05)。在骨折愈合第4周,CLA組中大鼠脛骨骨折斷端ROI的BMD高于Control組,兩組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
?、酃钦蹟喽藱M截面積(CSA)測定:在骨折愈合第6周,CLA組中大鼠脛骨骨折斷端ROI的CSA明顯高于Control組(P<0.05)。在骨折愈合第4周,CLA組中大鼠脛骨骨折斷端ROI的CS
6、A高于Control組(P>0.05)。
④骨強度指數(shù)(BSI)的計算分析:在骨折愈合第6周,CLA組中大鼠脛骨骨折斷端ROI的BSI明顯高于Control組(P<0.05)。在骨折愈合第4周,CLA組中大鼠脛骨骨折斷端ROI的BSI高于Control組(P>0.05)。
4、生物力學測試:在骨折愈合第6周,CLA組的最大彎曲應力明顯強于Control組(P<0.05)。
5、組織切片觀察:在骨折愈合第6周
7、,CLA組骨痂中心有部分軟骨細胞樣類骨質,骨痂內軟骨骨化明顯,充滿大量的骨樣類骨質,形成編織骨,骨痂邊緣骨橋形成完整,骨痂開始塑型;Control組骨痂中心僅為小部分肥大軟骨細胞,骨痂內有較多軟骨樣類骨質,骨痂邊緣部分骨橋形成。
結論:
1. CLA干預脛骨骨折大鼠,顯著提高血清ALP的活性,說明成骨細胞活躍,增加細胞成熟過程中礦化結節(jié)的數(shù)量,這提示CLA對成骨過程有一定的促進作用,DR攝片也同樣直觀說明CLA可促進
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