缺氧微環(huán)境對粘附分子調(diào)控增強胰腺癌侵襲力的研究.pdf

1、【目的】通過檢測缺氧誘導因子－1α（Hypoxia Induced Factor，HIF－1α）和粘附分子E-cadherin、integrinα5和integrinβ1在胰腺癌組織及人胰腺癌細胞株PANC－1中的表達，以及細胞侵襲力的變化，探討HIF－1α對胰腺癌粘附分子調(diào)控作用及侵襲轉(zhuǎn)移的影響。 【方法】應用免疫組化（EnVision System）檢測了34例胰腺癌和10例正常胰腺組織中HIF－1α、E-cadherin、

2、integrinα5和integrinβ1的表達情況，分析這些指標的相互關系及與臨床病理特點的關系。進一步對人胰腺癌細胞株PANC－1在不同缺氧培養(yǎng)時間下,采用RT-PCR 和Western blot術(shù)檢測HIF-1α、E-cadherin、integrinα5和integrinβ1的mRNA和蛋白表達變化；并用Matrigel膠檢測人胰腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的變化。應用YC-1阻斷HIF-1α后對上述各指標的作用。分析缺氧時各指標的表達

3、規(guī)律及與腫瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移的關系。 【結(jié)果】 1、HIF-1α和粘附分子在胰腺癌組織中的表達及意義在胰腺癌組織中HIF-1α、E-cadherin、integrinα5和integrinβ1蛋白表達陽性率分別為76.47％、38.21％、47.06％、91.18％。HIF-1α和integrinβ1的表達明顯高于正常胰腺組織（p <0.01和0.05），而E-cadherin和integrinα5的表達明顯低于正常胰腺組織

4、（p <0.01）。在胰腺癌組織中HIF-1α表達與E-cadherin、integrinα5的蛋白表達呈負相關（r＝-0.482，p <0.05；r＝-0.434，p <0.05）；與integrinβ1的蛋白表達呈正相關（r＝0.366，p <0.05）。在胰腺癌組織中HIF-1α表達與腫瘤大小、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關（p <0.05）；E-cadherin、integrinα5和integrinβ1與腫瘤臨床分期和淋巴轉(zhuǎn)移有關（

5、p<0.05），與腫瘤大小無關；上述各指標與患者年齡，性別及病理分級無關。 2、缺氧微環(huán)境對人胰腺癌細胞株PANC－1細胞HIF-1α及粘附分子表達和侵襲力的影響不同缺氧時間和HIF-1α抑制劑YC－1對PANC－1細胞的HIF-1α和integrinβ1的mRNA 表達無明顯變化；E-cadherin和integrinα5的mRNA的表達均隨缺氧時間的延長而下降(P <0.05),而應用YC-1后E-cadherin和inte

6、grinα5表達增強(P <0.05)。隨著缺氧時間的延長, HIF-1α蛋白表達逐漸上升,缺氧24 h 達到高峰(P <0.05),加用YC-1缺氧培養(yǎng)后，PANC－1細胞HIF-1α蛋白表達與常氧培養(yǎng)相似；E-cadherin和integrinα5的蛋白表達均隨缺氧時間的延長而下降(P <0.05),加用YC-1缺氧培養(yǎng)后，兩者的蛋白表達明顯高于缺氧培養(yǎng)(P <0.05)，與常氧培養(yǎng)相似。HIF-1α與E-cadherin、inte

7、grinα5的蛋白表達呈負相關（r＝－0.954 P <0.05；r＝－0.951，P <0.05）；integrinβ1的蛋白于各缺氧時間段及應用YC－1后均高表達，與對照組相似。細胞侵襲力檢測顯示：隨著缺氧時間延長,細胞侵襲能力增強(P <0.05),而YC-1可抑制缺氧所致的細胞侵襲力增強(P <0.05)。 【結(jié)論】 1、胰腺癌組織中HIF-1α和Integrinβ1呈高表達；E-cadherin和Integri

8、nα5呈低表達。并且HIF-1α的表達與腫瘤大小、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關；E-cadherin、Integrinα5和Integrinβ1與腫瘤臨床分期和淋巴結(jié)有關。提示HIF-1α、E-cadherin、Integrinα5和Integrinβ1在胰腺癌發(fā)展過程中起重要作用。 2、缺氧微環(huán)境可誘導PANC-1細胞株HIF-1α的蛋白高表達，而下調(diào)E-cadherin和Integrinα5的表達。加用YC-1抑制HIF-1α表