假基因PTENP1通過調控PTEN蛋白的表達影響胃癌進展的研究.pdf

1、背景:
　　長鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)是一類轉錄本長度超過200nt的RNA分子，它們缺乏蛋白編碼的潛能。近年來，大量證據(jù)表明lncRNAs能以RNA的形式在多種層面上（表觀遺傳調控、轉錄調控以及轉錄后調控等）調控基因的表達，從而在細胞增殖、細胞周期、分化和凋亡等多種生物學進程中發(fā)揮重要的作用。假基因轉錄得到的RNA也屬于lncRNA的一類，以前被認為沒有生物學功能，然而最近一些假

2、基因被證實在腫瘤的發(fā)生中發(fā)揮著關鍵的作用。PTENP1被發(fā)現(xiàn)在幾種腫瘤細胞中發(fā)揮著抑癌作用，然而它在胃癌中的表達和生物學功能仍不清楚。
　　目的:
　　研究胃癌組織和細胞系中PTENP1的表達水平及其與臨床病理資料的關系，并探索PTENP1在胃癌細胞中發(fā)揮的生物學功能及相關機制。
　　方法:
　　通過實時定量逆轉錄聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)檢測68例胃癌組織及4個胃癌細胞系中PTENP1的表達水平;通過去甲

3、基化藥物處理，研究PTENP1啟動子異常甲基化與其表達的關系;分別轉染pLJM-3'UTR或pLJM空質粒進入胃癌細胞系MGC-803及SGC-7901，通過CCK-8及平板克隆實驗研究PTENP1對胃癌細胞增殖能力的影響，通過流式細胞分析及Hoechst staining實驗研究PTENP1對細胞凋亡的影響，通過細胞劃痕實驗和transwell研究PTENP1對細胞遷移和侵襲能力的影響;通過qRT-PCR及Western blot分析

4、質粒轉染后PTEN的表達變化。
　　結果:
　　qRT-PCR檢測結果顯示PTENP1表達在胃癌組織和細胞系中顯著下調，其表達下調可能部分與DNA超甲基化有關。而且，PTENP1的低表達與腫瘤的大小、胃癌病人臨床分期、胃癌浸潤深度及淋巴結轉移有關。另外，結果顯示PTENP1能夠調節(jié)胃癌細胞的增殖、凋亡、遷移和侵襲。并且，PTENP13'UTR的表達升高能夠提高PTEN蛋白的表達水平。
　　結論:
　　PTENP1