HSP27mRNA、HSP70mRNA在培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞中的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過觀察高溫氧化作用對人晶狀體上皮細胞內(nèi)熱休克蛋白質(zhì)(HSP)表達的影響，來探討白內(nèi)障的發(fā)病機制，試圖證明HSP27、HSP70可能參與了對晶狀體的保護作用。 方法：人HLB-C3細胞系(由中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院的眼科學(xué)系提供)含15％的小牛血清在DMEM37℃培養(yǎng)箱里培育。培育后的晶狀體細胞分為對照組和兩個實驗組(Ⅰ、Ⅱ)，實驗組Ⅰ在高溫(45℃)條件下培養(yǎng)30分鐘后，于不同時間段(0h，2h，4h，6h，16h，24

2、h)采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平，實驗組Ⅱ在氧化(50mmol/LH2O2)條件培養(yǎng)30分鐘后，恢復(fù)至正常條件下，在生物介質(zhì)中恢復(fù)于不同時間段(0h，2h，4h，6h，16h，24h)，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平，對照組于不同時間段(0h，2h，4h，6h，16h，24h)，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測HS

3、P27mRNA、HSP70mRNA的水平，以β-actin作為內(nèi)參校正，并對獲得的指標(biāo)進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果：生理狀態(tài)下和高溫、氧化狀態(tài)下均有熱休克蛋白質(zhì)的表達，高溫應(yīng)激和氧化應(yīng)激后2小時導(dǎo)致HSPmRNA的水平增加。統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)HSP27、HSP70高溫組和氧化組的表達明顯高于對照組，有顯著性差異(p＜0.05)。并且每組HSP27mRNA、HSP70mRNA的表達到達峰值的時間間隔從2h到6h不等。以后逐漸降低，但是他們?nèi)?/p>

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