通過RNA干涉（RNAi）阻止免疫應答前狂犬病病毒感染的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究利用siRNA的干涉作用研究特異性siRNA對狂犬病病毒復制的抑制作用。針對翻譯狂犬病病毒糖蛋白(G)和核蛋白(N)的mRNA各設計出3對特異的siRNA的轉錄前體-小DNA分子，合成后克隆到載體pSiencer2.1-U6中，經測序成功獲得了轉錄載體。然后將轉錄載體轉染BHK-21細胞。采用穩(wěn)定轉染和瞬時轉染兩種方式。獲得穩(wěn)定轉染的BHK-21細胞后，按1％比例接種狂犬病病毒8202，48h后采用直接免疫熒光和RT-PCR檢測狂

2、犬病病毒的復制情況，結果表明：N19對狂犬病病毒復制的干擾效果最好；G69次之；G18、G21起到了一些干擾作用，但效果不明顯；N35、N38沒有干擾效果。瞬時轉染時同步接毒，48h后同樣采用直接免疫熒光檢測狂犬病病毒的復制情況，結果表明：瞬時轉染時siRNA的干擾效果不理想。將穩(wěn)定轉染后的BHK-21-G69、BHK-21-N19細胞的裂解物和轉錄載體pSiencer2.1-U6-siRNA-G69、pSiencer2.1-U6-si

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