PV-殺白細胞素(PVL)S組分對人急性髓系白血病THP-1細胞株的作用及機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:PV-殺白細胞素(Panton-ValentineLeukocidin,PVL)是由金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的細胞外毒素。PVL有LukS-PV和LukF-PV兩個成分組成。在先前的研究中,我們報道了PVL及其組分能夠誘導人多形核粒細胞凋亡。本課題的目的:(1)檢測rLukS對人髓系白血病THP-1細胞增殖和凋亡的影響;(2)探討rLukS對THP-1細胞增殖抑制和誘導凋亡的作用機制。
　　方法:體外培養(yǎng)THP-1細胞,用不同濃度

2、rLukS(0,0.05,0.25,0.5,0.75和1μM/L)作用THP-1細胞3,6,9和12h,采用MTS法檢測細胞增殖抑制率;分別用不同濃度rLukS(0,0.05,0.5和1μM/L)作用于THP-1細胞12h后,用TUNEL法檢測細胞凋亡壞死;利用流式細胞儀通過AnnexinVFITC/PI染色法檢測細胞凋亡,PI染色法檢測細胞周期;用Westernblot方法檢測細胞周期蛋白;用凋亡PCR芯片(CatalogNo.PAH

3、S-012A),檢測經(jīng)1μM/LrLukS處理前后凋亡相關基因表達的差異,然后采用Westernblot方法驗證芯片結果。
　　結果:rLukS抑制THP-1細胞的增殖,且抑制作用呈時間濃度依賴關系;rLukS將THP-1細胞阻滯在G0/G1期并且下調細胞周期蛋白cyclinD1;rLukS誘導細胞的凋亡率和濃度成正比;芯片結果顯示經(jīng)1μM/LrLukS處理的THP-1細胞前后基因表達差異主要涉及的是Bcl-2家族、caspase

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