糖痛方治療糖尿病血管神經(jīng)病變的臨床與實驗研究.pdf

1、糖尿病周圍神經(jīng)病變和下肢血管病變是糖尿病常見的兩種慢性并發(fā)癥。神經(jīng)功能檢查發(fā)現(xiàn)，60％-90％的糖尿病患者有不同程度的周圍神經(jīng)病變，其中30％-40％的患者無相關(guān)臨床表現(xiàn);踝肱指數(shù)檢查發(fā)現(xiàn)，50歲以上的糖尿病患者，下肢動脈病變的患病率高達19.47％-23.80％。糖尿病血管病變是糖尿病神經(jīng)病變的病理基礎(chǔ)，是糖尿病神經(jīng)病變產(chǎn)生和加重的重要原因，兩種病變密切相關(guān)，是引起糖尿病足和導(dǎo)致糖尿病患者下肢截肢的主要因素，嚴重影響了糖尿病患者的生存

2、質(zhì)量。近年來，中醫(yī)藥在防治糖尿病周圍神經(jīng)病變和下肢血管病變方面發(fā)揮了重要作用，它能夠明顯改善患者的臨床癥狀、提高周圍神經(jīng)的傳導(dǎo)速度、增加下肢血液供應(yīng)，從而降低糖尿病足和下肢截肢的發(fā)生率。本文在導(dǎo)師“三型辨證”學(xué)術(shù)思想的指導(dǎo)下，依托導(dǎo)師承擔的國家自然科學(xué)基金項目“從ICAM-1介導(dǎo)的神經(jīng)細胞凋亡探討中藥干預(yù)糖尿病周圍神經(jīng)病變機制”，通過觀察導(dǎo)師的經(jīng)驗方“糖痛方”的臨床與實驗療效，探討“糖痛方”治療糖尿病血管神經(jīng)病變的作用機制。全文由理論研

3、究、臨床研究和實驗研究三部分組成。
　　1.理論研究
　　理論研究由三章構(gòu)成:第一章主要介紹林蘭教授治療糖尿病及其并發(fā)癥的學(xué)術(shù)思想，詳細闡述糖尿病“三型辨證”理論體系的形成過程、糖尿病“三型辨證”理論的臨床應(yīng)用、林蘭教授辨治糖尿病周圍神經(jīng)病變和下肢血管病變的學(xué)術(shù)思想，以及中藥“糖痛方”的組方依據(jù)。第二章介紹糖尿病周圍神經(jīng)病變的研究進展，總結(jié)近年來糖尿病周圍神經(jīng)病變的西醫(yī)發(fā)病機制、中醫(yī)病因病機以及治療方法。第三章介紹糖尿病下肢

4、血管病變的研究進展，總結(jié)近年來糖尿病下肢血管病變的西醫(yī)發(fā)病機制、中醫(yī)病因病機以及治療方法。
　　2.臨床研究
　　目的:觀察糖痛方加減治療糖尿病血管神經(jīng)病變的臨床療效，探討糖痛方治療糖尿病血管神經(jīng)病變的作用機制。
　　方法:選擇符合糖尿病周圍神經(jīng)病變（氣虛血瘀型）的患者作為觀察對象，隨后分為兩組:治療組與對照組。兩組患者均予飲食治療、運動治療，并根據(jù)每位患者的自身情況予以相應(yīng)的降糖、降壓治療，對照組采用胰激肽原酶腸溶片

5、治療，每次240IU，3次/日，治療組在對照組的基礎(chǔ)上加用糖痛方加減方治療，每日1劑，分2次服，共治療3個月。采集患者的一般資料，如性別、年齡、身高、體重、病程等情況;根據(jù)中醫(yī)臨床癥狀積分表，對每一例患者治療前、治療后的臨床癥狀進行評分;分別于治療前、治療后檢測患者的空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血脂水平、凝血功能、肝功能、腎功能、踝肱指數(shù)(ABI)，采用肌電圖儀檢測周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度，采用彩

6、色多普勒儀檢測下肢血管情況。最后，采用spss18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，顯著性水平設(shè)定為α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1.中醫(yī)臨床癥狀積分比較:治療前，兩組患者的單項癥狀積分比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);治療后，與對照組比較，治療組患者神疲乏力、氣短懶言、頭暈眼花、肢體麻木、肢體疼痛、肢端發(fā)涼癥狀明顯改善(P＜0.05)。
　　2.血糖水平比較:治療前，兩組患者FBG、2hPBG、HbA1c比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P

7、＞0.05);治療后，兩組患者FBG、2hPBG、HbA1c均明顯下降(P＜0.05)，治療組與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.血壓和體重指數(shù)比較:治療前，兩組患者收縮壓、舒張壓、體重指數(shù)比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);治療后，兩組患者收縮壓、舒張壓、體重指數(shù)均明顯下降(P＜0.05)，治療組與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　4.血脂水平比較:治療前，兩組患者血脂各項指標比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P

8、＞0.05);治療后，對照組血脂各項指標均無明顯改善(P＞0.05)，治療組CHO、TG、LDL-C下降明顯，與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　5.凝血功能比較:治療前，兩組患者凝血功能各項指標比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);治療后，兩組凝血功能各項指標均有所改善(P＜0.01)，其中治療組在“活化部分凝血活酶時間”和“纖維蛋白原”兩個方面改善明顯，與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　6.神經(jīng)傳導(dǎo)

9、速度比較:治療前，兩組患者各條神經(jīng)傳導(dǎo)速度比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);治療后，治療組各條神經(jīng)傳導(dǎo)速度均明顯增加(P＜0.01)，其中脛神經(jīng)、腓總神經(jīng)、腓腸神經(jīng)傳導(dǎo)速度增加明顯，與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　7.踝肱指數(shù)比較:治療前，兩組患者踝肱指數(shù)比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);治療后，兩組患者踝肱指數(shù)均明顯升高(P＜0.01)，與對照組比較，治療組升高更明顯(P＜0.05)。
　　8.下肢血管多普

10、勒超聲檢查:治療前，兩組患者股動脈、胭動脈、足背動脈直徑比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);治療后，兩組患者各條動脈直徑均有所增粗(P＜0.05)，與對照組比較，治療組增加更明顯(P＜0.05)。
　　9.總療效比較:治療組總有效率為85.71％;對照組總有效率為65.91％，治療組療效優(yōu)于對照組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:糖痛方配合胰激肽原酶腸溶片治療糖尿病血管神經(jīng)病變患者，可以明顯改善患者的臨床癥狀，通過降低患者膽固醇、

11、甘油三脂和低密度脂蛋白調(diào)節(jié)患者的血脂水平，通過抑制血小板聚集和降低纖維蛋白原水平調(diào)節(jié)患者的凝血功能，通過增加下肢動脈直徑改善下肢血液供應(yīng)，通過改善周圍神經(jīng)的血液供應(yīng)減輕神經(jīng)缺血缺氧進而提高周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度。與對照組比較發(fā)現(xiàn)，糖痛方治療糖尿病血管神經(jīng)病變的機制與調(diào)節(jié)血脂水平和凝血功能密切相關(guān)，血脂水平和凝血功能的上述改變可以減少動脈血栓和斑塊形成，從而改善患者下肢和周圍神經(jīng)的血液供應(yīng)，進而提高患者的踝肱指數(shù)和周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度，最終達到改善

12、患者臨床癥狀的目的。
　　3.實驗研究
　　目的:觀察糖痛方對糖尿病大鼠肢體缺血再灌注后坐骨神經(jīng)和股動脈的影響，探討糖尿病周圍神經(jīng)病變和下肢血管病變的發(fā)病機制以及糖痛方的保護機制。
　　方法:110只雄性SD大鼠，隨機選擇18只作為正常對照組，剩余大鼠采用鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射形成糖尿病大鼠模型。飼養(yǎng)4周后，臨時阻斷糖尿病模型大鼠的腹主動脈、右側(cè)髂動脈和右側(cè)股動脈，形成糖尿病大鼠右下肢缺血再灌注模型，然后將其隨機

13、分為4組:模型對照組、糖痛方小劑量組、糖痛方中劑量組、糖痛方大劑量組。糖痛方小、中、大劑量組分別按成人每公斤給藥劑量的3.5倍、7倍、14倍灌胃給藥，模型對照組和正常對照組大鼠灌服純凈水，每日1次，灌胃8周。觀察各組大鼠的精神狀態(tài)、日?；顒印⑦M食量、飲水量、尿量及毛色變化情況，每2周測量1次大鼠體重和尾尖血糖;治療后取血檢測大鼠血漿sICAM-1、MPO、血脂水平;測量大鼠尾神經(jīng)傳導(dǎo)速度、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度及動作電位波幅;觀察大鼠坐骨神經(jīng)

14、和股動脈形態(tài)學(xué)變化;分別采用ICAM-1、TNF-a、MPO、8-OHdG、tunel對坐骨神經(jīng)和股動脈進行免疫組化染色;采用Western Blot檢測大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng)ICAM-1和MPO的表達水平;采用Real Time PCR檢測大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng)ICAM-1 mRNA的表達水平。最后，采用spss18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，顯著性水平設(shè)定為α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠體重比較:造模前(0W)各組大鼠體重比較

15、無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);分組灌胃前(5W)，糖痛方小、中、大劑量組與模型對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，與正常對照組比較，各治療組大鼠體重明顯偏輕(P＜0.01);灌胃治療后(13W)，糖痛方小、中、大劑量組與模型對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，與正常對照組比較，各治療組大鼠體重明顯偏輕(P＜0.01)。
　　2.大鼠血糖比較:造模后(0W)糖尿病大鼠血糖水平迅速升高，與正常大鼠比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01

16、);分組灌胃前(5W)，糖痛方小、中、大劑量組與模型對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，與正常對照組比較，各治療組大鼠血糖顯著升高(P＜0.01);灌胃治療后(13W)，糖痛方小、中、大劑量組與模型對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，與正常對照組比較，各治療組大鼠血糖顯著升高(P＜0.01)。
　　3.治療后血脂水平比較:與正常對照組比較，模型對照組大鼠血漿CHO、TG、LDL-C均明顯升高(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中

17、、大劑量治療后CHO、TG、LDL-C逐漸下降，各治療組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　4.治療后血漿sICAM-1和MPO比較:與正常對照組比較，模型對照組血漿sICAM-1、MPO水平均明顯升高(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后，治療組sICAM-1、MPO逐漸下降，各治療組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　5.治療后電生理各項指標比較:與正常對照組比較，模型對照組尾

18、神經(jīng)傳導(dǎo)速度、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度及動作電位波幅均明顯下降(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后尾神經(jīng)傳導(dǎo)速度、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度及動作電位波幅逐漸升高，各治療組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　6.形態(tài)學(xué)觀察:與正常對照組比較，模型對照組大鼠坐骨神經(jīng)和股動脈損傷明顯，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后坐骨神經(jīng)和股動脈損傷明顯改善。
　　7.免疫組化染色:與正常對照組比較，模型對照組坐骨神經(jīng)ICAM-1、TN

19、F-a表達水平明顯增高(P＜0.01)，股動脈ICAM-1、TNF-a、8-OHdG表達水平明顯增高(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后，坐骨神經(jīng)ICAM-1、TNF-a表達水平逐漸下降，各治療組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，股動脈ICAM-1、TNF-a、8-OHdG表達水平逐漸下降，其中糖痛方中、大劑量組與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　8.TUNEL染色結(jié)果:正常對照組大鼠坐骨神

20、經(jīng)Tunel染色偶見凋亡細胞，模型對照組大鼠坐骨神經(jīng)可見大量凋亡細胞，與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后坐骨神經(jīng)凋亡細胞逐漸減少，糖痛方中、大劑量組與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。
　　9.Western blot檢測結(jié)果:與正常對照組比較，模型對照組大鼠坐骨神經(jīng)ICAM-1和MPO表達水平明顯升高(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后坐骨神經(jīng)ICAM-1和MPO表達水

21、平逐漸下降，糖痛方中、大劑量組與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　10.Real Time PCR檢測結(jié)果:與正常對照組比較，模型對照組大鼠坐骨神經(jīng)ICAM-1 mRNA表達水平明顯升高(P＜0.01)，經(jīng)糖痛方小、中、大劑量治療后坐骨神經(jīng)ICAM-1 mRNA表達水平逐漸下降，各治療組與模型對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:肢體缺血再灌注可以短期內(nèi)同時引起糖尿病大鼠周圍神經(jīng)病變和下肢血管

22、病變，表現(xiàn)為坐骨神經(jīng)和股動脈形態(tài)學(xué)改變、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度下降和神經(jīng)細胞凋亡增多，其發(fā)生機制與氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)增強密切相關(guān)，表現(xiàn)為血漿sICAM-1、MPO、坐骨神經(jīng)ICAM-1、TNF-a、MPO和股動脈ICAM-1、TNF-a、8-OHdG表達水平升高。糖痛方可以通過降低血漿sICAM-1、MPO、坐骨神經(jīng)ICAM-1、TNF-a、MPO以及股動脈ICAM-1、TNF-a、8-OHdG的表達水平，減弱血管神經(jīng)組織的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)