加壓培養(yǎng)對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞存活狀態(tài)的影響.pdf

1、中國醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學位論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。論文作者簽名：中國醫(yī)科大學研究生學位論文版權(quán)

2、使用授權(quán)書本人完金了解中國醫(yī)科大學有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學，且導師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學。學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名：指導教師簽名

3、：日一獸中文論著摘要加壓培養(yǎng)對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞存活狀態(tài)的影響目的青光眼是世界第二大致盲性眼病，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(Retinalganglioncells，RGCs)的凋亡是青光眼發(fā)病的基本病理機制，眼內(nèi)壓升高是最重要的危險因素，但是眼內(nèi)壓引起RGCs凋亡的確切機制還不清楚。有研究表明遺傳因素在青光眼的發(fā)病中起著重要的作用。OPTN基因是POAG確定的兩個致病基因之一，研究證實其在細胞存活和凋亡中起到調(diào)控作用。本實驗對RGC5(Retin

4、alganglioncell5)進行加壓培養(yǎng)，通過對不同壓力培養(yǎng)條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的生長存活率、凋亡情況及OPTN基因表達等指標的觀察，分析不同壓力培養(yǎng)條件下RGC5細胞的活性和總體存活狀態(tài)，從而初步探討壓力對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的直接作用及影響。方法對傳代培養(yǎng)的RGC5分別給予0、20、40、60、80mmHg壓力48dx時，應(yīng)用MTT方法和流式細胞學檢測方法檢測壓力對RGC5細胞存活率和凋亡的影響。應(yīng)用免疫組織化學方法、QRealt

5、imePCR和WesternBlot的方法檢測壓力作用下培養(yǎng)的RGC5細胞OPTN基因的表達量。統(tǒng)計結(jié)果均以均數(shù)士標準差表示，各組間的比較用配對t檢驗分析方法，均用SPSSl30軟件進行統(tǒng)計分析。多士甲當日7卜1、培養(yǎng)的RGC5細胞呈梭型，平均分裂時間為23天左右，細胞生長旺盛。2、M訂和流式檢測結(jié)果顯示在加壓處理48dx時后RGC5存活率隨著壓力的增高逐漸下降，各組間差異有顯著的統(tǒng)計學意義(P001)；RGC5細胞凋亡率不斷增高，在4