法舒地爾對脂多糖誘導大鼠急性肺損傷的影響.pdf

1、目的：急性肺損傷的致病因素有很多，肺血管內(nèi)皮細胞破壞，血管通透性增高是急性肺損傷的特征之一。本實驗擬探討RhoA/Rho激酶途徑和相關骨架蛋白參與肺血管內(nèi)皮細胞屏障破壞的分子機制，及法舒地爾對脂多糖誘導的急性肺損傷的保護作用。
　　方法：18只健康Wistar大鼠隨機分三組：對照組（Control組）、脂多糖組（LPS組）及法舒地爾組（Fasudil組），每組各6只。LPS組采用―二次打擊‖方式建立模型，腹腔注射(IP)LPS1

2、mg/kg，16 h后氣管滴注(IT)LPS3 mg/kg；Fasudil組在IP前30 min和IT1 h后給予fasudil10 mg/kg干預處理；Control組則在相應時間點給予等容生理鹽水。于造模后3h各時間點處死大鼠取肺。①HE染色觀察肺組織形態(tài)學改變。②肺組織濕/干重比（W/D），MDA含量、MPO活性檢測肺損傷程度。③Real-Time PCR及Western-Blot法分別檢測RhoA、ROCK2及p-ERM在肺組織

3、中的表達。
　　結(jié)果：⑴病理形態(tài)學檢查提示，LPS組炎性細胞滲出嚴重，肺泡破裂，間質(zhì)水腫，經(jīng) fasudil干預后，炎性細胞滲出有所減少，肺泡結(jié)構(gòu)破壞減輕。⑵肺組織W/D，MDA含量和MPO活性檢測結(jié)果提示，與Control組相比，LPS組中W/D、MDA含量和MPO活性均顯著增加（P<0.01），而Fasudil組卻有所下降（P<0.05），其中以MDA和MPO顯著降低（P<0.01）。⑶mRNA水平表達提示，RhoA mRNA

4、和ROCK2 mRNA在LPS組表達顯著增高（P<0.01），而在Fasudil組ROCK2 mRNA表達卻有降低（P<0.05），而RhoA卻沒有改變（P>0.05）；蛋白水平表達提示，ROCK2和p-ERM在LPS組中高表達（P<0.01），在Fasudil組中低表達（P<0.05)，RhoA卻沒有明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：①脂多糖可誘導大鼠典型的急性肺損傷，可能通過 RhoA/ROCK信號通路引起細胞骨架的改變，