酵母表達(dá)的MIP-2γ-GM-CSF融合蛋白的生物學(xué)功能及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、本研究通過(guò)基因工程方法構(gòu)建高表達(dá)MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株，并優(yōu)化發(fā)酵、純化條件。以MTT法和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在體外的促造血增殖活性；以transwell體系檢測(cè)融合蛋白對(duì)免疫造血細(xì)胞的趨化活性，進(jìn)行了動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，研究MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對(duì)放療引起的造血損傷的修復(fù)作用和對(duì)荷瘤小鼠的抗腫瘤效應(yīng)，并研究了其相關(guān)的作用機(jī)制。本課題分為兩部分：在第一部分研究中，我們通過(guò)基因

2、工程方法構(gòu)建篩選了高表達(dá)MIP-2γ/hGM-CSF、MIP-2γ/mGM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株，并通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵、純化技術(shù)，制備了兩種融合蛋白。在第二部分研究中，我們首先證實(shí)了MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在體外能夠顯著促進(jìn)造血細(xì)胞增殖，有效趨化免疫活性細(xì)胞，并研究了其作用機(jī)制。在此基礎(chǔ)上進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，顯示MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對(duì)放療造成的造血損傷具有良好的治療作用，同時(shí)具有一定的抗腫瘤效應(yīng)。我們還首次發(fā)現(xiàn)M