長(zhǎng)鏈非編碼RNA-SRHC在肝癌中的表達(dá)和功能.pdf

1、目的:一、進(jìn)一步了解肝癌中長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)的改變及其臨床意義。
　　 二、進(jìn)一步了解長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 方法:一、從前期所做的高轉(zhuǎn)移性肝癌和低轉(zhuǎn)移性肝癌長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)譜芯片中挑選一條在癌與癌旁有明顯差異以及在高轉(zhuǎn)移性肝癌和低轉(zhuǎn)移性肝癌之間有差異表達(dá)的lncRNA。
　　 二、通過(guò)5'3'RACE實(shí)驗(yàn)得該長(zhǎng)鏈非編碼RNA的全長(zhǎng)序列。
　　 三、從東方肝膽外科醫(yī)院國(guó)家肝臟

2、組織樣本庫(kù)挑選81例肝癌病人的癌組織及遠(yuǎn)端正常肝臟組織，利用實(shí)時(shí)定量PCR的方法檢測(cè)該長(zhǎng)鏈非編碼RNA在這些樣本中的表達(dá)，并分析表達(dá)量與各臨床指標(biāo)的相關(guān)性。
　　 四、運(yùn)用甲基化測(cè)序等方法研究DNA甲基化對(duì)其表達(dá)的影響。
　　 五、包裝過(guò)表達(dá)該長(zhǎng)鏈非編碼RNA的慢病毒，以此為工具通過(guò)體內(nèi)體外的實(shí)驗(yàn)對(duì)其功能進(jìn)行研究。
　　 結(jié)果:一、該條新的未被研究過(guò)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA（我們稱之為SRHC，StrikinglyRe

3、duced in Hepatocellular Carcinomas）在肝癌中表達(dá)顯著下調(diào)，在約80％的肝癌中表達(dá)低于對(duì)應(yīng)的癌旁組織，在20％的肝癌組織未能檢測(cè)到其表達(dá)。
　　 二、SRHC在大部分肝癌細(xì)胞系中表達(dá)極低或缺失(如SMMU-7721、HCCLM3)。
　　 三、SRHC有三種不同的剪切形式，剪切體1使其最主要的剪切形式。
　　 四、在81例肝癌病人中分析其表達(dá)量與臨床病理特征的相關(guān)性顯示SRHC的表