HBV-TR重組腺病毒載體的構建及其在小鼠肝臟的表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為進一步研究HBV-TR基因在體內的表達,以及為該基因在乙型肝炎小動物模型體內的抗病毒功能研究和臨床應用研究奠定基礎,該課題首先構建了HBV-TR重組腺病毒載體,在HEK293細胞中大量擴增至一定滴度后感染正常小鼠,然后用免疫組織化學的方法研究該重組腺病毒在正常小鼠體內,特別是肝臟的表達狀況及其毒性反應.該研究使用AdMax Kit D系統完成HBV-TR重組腺病毒載體的構建.首先是構建穿梭質粒(shuttle plasmid),Bam

2、H Ⅰ和HindⅢ雙酶切pcDNA3.1(-)/TR得到TR基因片段,同時用BglⅡ和HindⅢ雙酶切質粒載體pDC316,然后用T4 DNA連接酶將TR基因片段插入質粒載體pDC316,從而得到穿梭質粒pDC316/TR.使用相同的方法構建對照組穿梭質粒pDC316/TRm、pDC316/hEDN和pDC316/HBc.該課題成功構建了乙型肝炎病毒靶向核糖核酸酶基因的重組腺病毒載體AdTR及其對照載體AdTRm、AdhEDN、AdHB

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