rhG-CSF對糖尿病并發(fā)腦梗死大鼠神經細胞增殖的實驗研究.pdf

1、前言: 隨著人口增加及老齡化程度的加重，糖尿病患者有明顯上升趨勢，對糖尿病患者生活質量威脅最大的是血管并發(fā)癥，并且主要以腦梗死為主。其病變范圍廣泛，復發(fā)率病死率高。有關糖尿病合并腦血管病的治療方面的研究日益受到神經科學領域的重視。G-CSF是骨髓造血干細胞的強有力的動員劑，已經證實G-CSF具有同時動員造血干細胞和間充質干細胞的能力。應用G-CSF動員自體骨髓干細胞可促進骨髓干細胞向腦內遷移、增殖、分化[4]。在腦梗死的特定病理

2、環(huán)境中向神經細胞分化，以修復梗死的腦組織或保護神經細胞免受損傷。本研究在糖尿病模型基礎上，進行局灶腦缺血再灌注模型(MCAO)制備，對大鼠進行rhG-CSF干預，采用免疫組化方法研究糖尿病腦缺血再灌注后大鼠腦組織內BrdU的表達情況。為臨床治療糖尿病合并缺血性腦血管病提供理論依據。 實驗方法: 取健康Wistar大鼠，腹腔注射四氧嘧啶制備糖尿病模型，6周后采用改良線栓法建立大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)模型。大鼠隨機分成

3、對照組、rhG-CSF組，每組又分7d、14d和21d個時間點，每一時間點均為12只大鼠。G-CSF干預組術后每日頸部皮下注射rhG-CSF50μg/kg，對照組注射等量的生理鹽水。各組同時腹腔注射BrdU10mg/kg。采用Chen等制定的神經功能評分標準。免疫組化法檢測BrdU蛋白的表達；各組于術后7d、14d、21d分別取12只大鼠，分別在高倍鏡(400×)下隨機觀察缺血側額頂葉及紋狀體區(qū)不重疊的5個高倍視野，顯微圖像分析系統(tǒng)采集

4、圖像，計數陽性細胞數，取其平均數。各組數據均以x±s表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行方差分析及t檢驗，各組數據行單因素方差分析ANOVA，P<0.05有統(tǒng)計學意義。 實驗結果: 1、神經功能評分結果腦缺血1d時各組神經功能評分無顯著差異；7d、14d、21d后rhG-CSF干預組神經功能評分明顯低于對照組(P<0.01)。 2、BrdU免疫組織化學染色結果rhG-CSF干預組和對照組大鼠在腦缺血周邊區(qū)均有