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文檔簡介
1、Runx3(PEBP2αC/CBFA3/AML2)是新近發(fā)現的一種抑癌基因,屬于runt結構域轉錄因子家族成員,參與對細胞生長和凋亡的調控。近年來,大量的研究表明Runx3與多種惡性腫瘤尤其是與胃癌的關系非常密切,因此有望成為胃癌診斷的特異性標志物和基因治療的靶點。但目前國內外眾多文獻報道的胃癌Runx3基因甲基化陽性率差異較大,且其與Runx3表達并不完全平行。因此Runx3基因CpG島不同位點甲基化對于該基因沉默的作用可能不同。
2、 目的: 研究人胃癌Runx3基因CpG島甲基化的關鍵位點和演進。 材料與方法: 1、材料 26例人胃癌和相應的癌旁正常組織均來自中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院2006年2月至2006年12月手術切除并于-80℃保存的標本,其中男性16例,女性10例,年齡24-80歲,平均58.7歲;分化情況:低分化(未分化或低分化)17例,高分化(中分化或高分化)9例;國際抗癌聯(lián)盟分期(UICC,1997):Ⅰ期7例,Ⅱ
3、期4例,Ⅲ期8例,Ⅳ期7例。 2、甲基化特異性PCR(MSP)應用MSP法檢測上述組織標本中Runx3基因CpG島從5'區(qū)向轉錄起始點方向連續(xù)6個位點的甲基化狀態(tài),并計算所有位點甲基化的陽性率。 3、Western blot應用western blot法檢測上述組織標本中Runx3蛋白的表達,取Runx3蛋白的灰度值/Tubulin的灰度值代表Runx3蛋白的相對表達水平進行統(tǒng)計學分析。 4、統(tǒng)計學分析實驗結果經
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