miR-21、miR-15a和miR-16在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究背景:
　　 多發(fā)性骨髓瘤(MM)是克隆性漿細(xì)胞的異常增殖，并可導(dǎo)致克隆性免疫球蛋白異常增高的一種惡性腫瘤。多發(fā)性骨髓瘤是一種常見的漿細(xì)胞病，浸潤(rùn)骨髓及軟組織，產(chǎn)生M球蛋白。發(fā)生率占血液系統(tǒng)腫瘤的10％，占所有腫瘤的1％，死亡率占所有腫瘤的2％。惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移通常是多個(gè)相關(guān)基因發(fā)生改變的過程。以往學(xué)者們對(duì)多發(fā)性骨髓瘤研究大都集中在編碼蛋白的基因上，近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一類內(nèi)源性的非編碼微RNA(microRNA，miR

2、NA)引起了研究人員的極大興趣,從此開辟了腫瘤研究的新領(lǐng)域，為進(jìn)一步探索多發(fā)性骨髓瘤的分子發(fā)生機(jī)制對(duì)提高骨髓瘤治療水平與預(yù)后具有重要的意義。
　　 MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼的RNA，其大小長(zhǎng)約22個(gè)核苷酸。成熟的miRNAs是被初級(jí)的轉(zhuǎn)錄物經(jīng)過核酸酶的剪切加工產(chǎn)生的，之后組合進(jìn)入RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體(RISC)當(dāng)中，進(jìn)而引起靶mRNA的降解或翻譯水平上的抑制。但是m

3、iRNA發(fā)揮哪一種作用是根據(jù)miRNA與靶mRNA之間的互補(bǔ)程度來(lái)決定的。如果兩者完全互補(bǔ)時(shí)，就可以使靶mRNA降解，兩者不完全互補(bǔ)，則可以使靶mRNA翻譯水平上的抑制。miRNAs異常表達(dá)與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[3,4]，很可能是一類潛在的癌基因[5,6]或著是抑癌基因[7]。
　　 目的:
　　 通過檢測(cè)miR-21、miR-15a和miR-16基因在多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者中的表達(dá)水平，從而進(jìn)一步研究其在骨髓瘤的發(fā)生

4、發(fā)展、治療預(yù)后中可能的作用及其臨床意義，并分析與常用腫瘤負(fù)荷指標(biāo)血漿β2微球蛋白(β2-MG)水平的相關(guān)性。
　　 方法:
　　 1、研究對(duì)象:收集35例MM患者骨髓液，分為初治組（12例）、緩解組（10例）與難治組(13例)。15例門診非惡性血液病病人的骨髓液作為正常對(duì)照組。
　　 2、采用熒光定量RT-PCR(fluorescent quantitative reverse transcription pol

5、ymerase chain reaction)檢測(cè)各組miR-21，miR-15a和miR-16的表達(dá)情況并分析其意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、各組中miRNA-21的表達(dá)情況
　　 MM初治組共12例，緩解組共10例，難治組13例，將15例門診非惡性血液病病人的骨髓液作為正常對(duì)照組。MM初治組miR-21表達(dá)水平(3.4958±0.68115)明顯高于正常對(duì)照組表達(dá)水平(2.4920±0.8139)，差異有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），治療緩解組表達(dá)水平(2.3214±0.65260)明顯下降，與初治組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），而與正常對(duì)照組的表達(dá)水平相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），在難治組中miR-21的表達(dá)水平(4.1564±0.20437)高于初治組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 2、各組中miR-15a表達(dá)情況
　　 MM初治組miR-15a表達(dá)水平(1.0942±0.34731)明顯低于

7、正常對(duì)照組(2.8920±0.16644)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，治療緩解組表達(dá)水平(2.7786±0.14985)升高，與初治組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），而與正常對(duì)照組的表達(dá)水平相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），在難治組中miR-15a的表達(dá)水平(0.4105±0.11486)明顯低于初治組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 3、各組中miR-16表達(dá)情況
　　 MM初治組miR-1

8、6表達(dá)水平(1.1767±0.29212)明顯低于正常對(duì)照組表達(dá)水平（2.9427±0.18858），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，治療緩解組表達(dá)水平（2.8109±0.16383）升高，與初治組比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而與正常對(duì)照組的表達(dá)水平相比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05），在難治組中miR-16的表達(dá)水平（0.5901±0.13985）明顯低于初治組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4、miR

9、-21、miR-15a和miR-16與β2-MG水平的相關(guān)性分析
　　 骨髓瘤患者中β2-MG值與miR-21的表達(dá)水平(r=0.405，P＜0.05)顯著呈正相關(guān)，骨髓瘤患者中β2-MG值與miR-15a的表達(dá)水平(r=-0.601，P＜0.05)和miR-16的表達(dá)水平(r=-0.614，P＜0.05)均呈負(fù)相關(guān)。
　　 結(jié)論:
　　 1、MM初治患者中miR-21表達(dá)水平較正常對(duì)照組升高，miR-15a和m