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1、目的:分別觀察第三代二氫吡啶類鈣通道阻滯劑拉西地平、氨氯地平對人臍靜脈內(nèi)皮細胞間粘附分子-1(ICAM-1)表達的影響,以探討二氫吡啶類鈣通道阻滯劑抗動脈粥樣硬化的作用機制.方法:1人臍靜脈內(nèi)皮細胞株-H8(HUVECs-H8)的傳代培養(yǎng):細胞的復(fù)蘇成功后,在37℃、5%CO<,2>的條件下,用含20%胎牛血清(FBS)DMEM培養(yǎng)基進行傳代培養(yǎng),待細胞長成致密單層后即可進行試驗.2分別將拉西地平和氨氯地平原料藥融于乙腈中,拉西地平的濃
2、度為2.63×10<'-2>mmol/ml,氨氯地平的濃度為2.63×10<'-3>mmol/ml.取拉西地平、氨氯地平溶液各20ml、60ml、120ml,分別加入到lml的LDL(1.1g/ml)中,充分混勻.然后分別取200ul的LDL加入到培養(yǎng)的HUVECs中(內(nèi)含2ml含20%FBS的DMEM培養(yǎng)液),37℃、5%CO<,2>溫箱中培養(yǎng)45分鐘;再分別加入TNF-a(濃度為2ng/ml)于培養(yǎng)的HUVECs中,37℃、5%CO
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