山橿有效部位的富集純化及質量控制研究.pdf

1、　　目的： 建立山橿有效部位的富集純化工藝和質量控制方法。
　　方法： 建立運用HPLC法測定球松素含量和紫外分光光度法測定山橿總黃酮含量的方法,運用統計分析軟件spss17.0對測定結果進行綜合評價；運用正交試驗方法確立有效部位的最優(yōu)提取工藝；通過考察大孔吸附樹脂類型、上樣條件、洗脫條件等主要指標,優(yōu)選純化工藝；選取10批純化樣品,建立山橿有效部位HPLC指紋圖譜,運用“一測多評”法同時測定其中4種主要成分的含量,建立有效部位

2、的質量控制方法。
　　結果： (1)球松素 HPLC 含量測定條件為：檢測波長 297nm,甲醇：水梯度洗脫,回歸方程為 Y=2896600X+50479(R=0.9996),線性范圍 0.01μg~2.01μg,平均加樣回收率為100.01%,RSD=1.35%(n=6)。(2)總黃酮含量的方法：以球松素為對照品,測定波長為286nm,回歸方程為Y=0.081x+0.008(R=0.9994),在2.22μg/mL~17.80

3、μg/mL 范圍內,線性關系良好,平均加樣回收率為 0.9973,RSD=2.64%(n=6)。(3)最優(yōu)的提取工藝條件： 12倍量70%乙醇,浸泡30分鐘,超聲提取1小時,重復提取3次。結果分別按各指標與原藥材比率計,總黃酮提取率4.23%,球松素提取率0.59%。純化工藝條件為：DM130型樹脂,按徑高比1：8裝柱, 上樣濃度0.05(g/ml) [以生藥材計],上樣4BV(倍樹脂量),流速3BV/h,上樣完成后靜置2h,以4BV的

4、純水進行除雜后,4BV的70%乙醇以3BV/h的速率進行洗脫,樹脂上樣3次后需再生。按照確定的工藝條件進行驗證,結果使最終的純化物中總黃酮含量達到 50.0%以上,球松素含量達到9.0%以上。(4)建立的HPLC指紋圖譜標示了12個共有峰,10批樣品相識度在0.96以上,通過已知化合物進行指認,確定了其中7個成分。在指紋圖譜建立的色譜條件下,同時建立了一測多評法,可以在僅有球松素對照品的情況下,運用校正因子同時測定四個主要有效成分的含量