瓠瓜種質資源的RAPD和ISSR分析.pdf

1、瓠瓜(Lagenaria siceraria(Molina.)Standley)是一種重要的蔬菜，經(jīng)過長期的進化和培育，中國的瓠瓜已形成了豐富品種資源，對瓠瓜種質資源的遺傳多樣性研究，有利于其種質資源的收集、保存，鑒定和合理利用。本研究采用RAPD和ISSR標記相結合，運用譜系聚類分析、主坐標分析對38個瓠瓜品種之間的親緣關系及遺傳多樣性進行研究。主要研究結果如下： 1．在前人研究的基礎上，本研究結合瓠瓜特點，綜合考慮各種因素，

2、摸索出一套操作簡便、快速、準確的高質量瓠瓜DNA提取和純化技術。 2．在前人研究的基礎上，借鑒其它葫蘆科作物的研究成果，采用正交試驗設計和溫度梯度試驗優(yōu)化RAPD和ISSR的擴增程序，摸索出一套適合于分析瓠瓜種質資源RAPD和ISSR反應體系。 3．從200條RAPD隨機引物中篩選出20條具有明顯多態(tài)性的引物，對38份瓠瓜材料進行分析，共擴增出203條RAPD標記帶，其中多態(tài)性條帶104條，多態(tài)性比率為51.2％；從40

3、條ISSR引物中篩選出12條能夠擴增出清晰條帶的ISSR引物，共擴增出115條ISSR標記帶，其中多態(tài)性條帶96條，多態(tài)性比率為83.5％。 4．RAPD和ISSR分析的兩組相似系數(shù)之間的相關系數(shù)r=0.784，(n=703)，表明應用這兩種技術對瓠瓜遺傳多樣性與親緣關系的分析具有較高的一致性和可信度，但這兩種聚類方法在個別品種分類上還存在一定的差異。 5．RAPD標記聚類分析將供試的38份種質可分為3個類群8組，主坐標

4、分析將其分為3個類群13組；ISSR聚類分析將供試的38份種質可分為5個類群8組，主坐標分析將其分為4個類群10組。結果表明，應用RAPD和ISSR標記就足以對供試的材料進行有效的類群劃分。 6．對供試瓠瓜材料RAPD結果進行聚類分析，結果表明：品種間的遺傳相似系數(shù)在0.22～0.94；而依據(jù)ISSR分析結果品種間的遺傳相似系數(shù)為0.25～0.96。RAPD和ISSR分子標記表現(xiàn)出與瓠瓜的農(nóng)藝性狀分類和地區(qū)分布有一定的相關性，揭