太子參多糖及姜黃素激活Nrf2緩解胰島素抑制作用機制研究.pdf

1、目的:檢測太子參多糖（pseudostellaria heterophylla polysaccharide，PHP）減輕鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導糖尿病小鼠降血糖作用以及姜黃素(Curcumin,Cur)對百草枯(paraquat，PQ)誘導的胰島素抵抗(Insulin Resistance，IR)模型Nrf2抗氧化系統(tǒng)作用，探討中藥治療糖尿病及緩解胰島素抵抗的藥物作用機制。
　　方法:
　　本

2、研究第一部分通過給C57BL/6J小鼠腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導糖尿病模型。測定小鼠隨機血糖，大于16.7mmol，判定模型成功。小鼠隨機分成3組，分別為:對照組、STZ模型組、STZ+PHP干預組（PHP組）。造模后，根據本實驗室預實驗結果給予PHP組小鼠含PHP（500 mg/Kg）的高脂飼料干預，連續(xù)干預7天。測定小鼠葡萄糖耐量，結果顯示有療效后，取材。留取小鼠血清樣品，迅速取小鼠胰島素敏感組織

3、肝臟、肌肉。而后采用TAB結合法測定小鼠血清MDA，蛋白免疫印跡方法(western blot，WB)檢測肝臟、肌肉組織PKBSer473、P-AMPK、Nrf2、NQO-1、IκBα等蛋白水平和磷酸化變化。
　　第二部分進行姜黃素治療百草枯氧化應激誘導C57BL/6J小鼠胰島素抵抗的實驗。小鼠隨機分成3組，分別為:對照組、PQ模型組、PQ+Cur干預組（Cur組）。葡萄糖耐量實驗檢測小鼠胰島素抵抗模型成功，Cur組小鼠進行姜黃素

4、灌胃治療7d，再次進行葡萄糖耐量實驗，顯示有療效，取材。留取血清樣品，迅速取小鼠胰島素敏感組織肌肉。提取出細胞核、線粒體，然后用TAB結合法測定小鼠肌肉組織及線粒體MDA。蛋白免疫印跡方法(western blot，WB)檢測肌肉組織蛋白水平和磷酸化變化。
　　結果:鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導的C57BL/6J小鼠糖尿病模型，小鼠Nrf2抗氧化系統(tǒng)和葡萄糖耐量均明顯受損。太子參多糖能明顯降低小鼠血清MD

5、A水平。進一步研究發(fā)現，太子參多糖可明顯激活小鼠AMPK及PKBSer473信號傳導，增強炎癥抑制蛋白IκBα的表達。胰島素敏感組織肝臟Nrf2系統(tǒng)被激活，但肌肉組織，太子參多糖激活Nrf2系統(tǒng)作用不明顯。
　　PQ氧化應激誘導的胰島素抵抗模型，小鼠Nrf2抗氧化系統(tǒng)和葡萄糖耐量均明顯受損。姜黃素可明顯激活小鼠Nrf2系統(tǒng)，促進Nrf2核轉位和NQO-1表達，小鼠血清MDA水平的降低與此相符，炎癥抑制蛋白IκBα的表達也增強。姜黃

6、素緩解氧化應激及炎癥反應，并對抗PQ氧化應激所致PKBSer473的損害。
　　結論:太子參多糖能夠有效抑制STZ誘導的C57BL/6J小鼠高血糖作用，其機制可能與改善胰島素信號傳導，減輕氧化應激反應，激活Nrf2信號通路及抑制炎性信號激活作用有關。同樣，姜黃素治療可激活PQ誘導的胰島素抵抗小鼠Nrf2抗氧化系統(tǒng)，改善胰島素信號傳導，減輕氧化應激和炎癥水平。
　　本研究表明，太子參多糖和姜黃素緩解胰島素抵抗作用與其增強內源性