軟骨多糖對肺癌的抑制作用及分子作用機制.pdf

1、目的
　　 研究硫酸軟骨素對肺癌的抑制作用，并探討其分子作用機制。
　　 方法
　　 1、常規(guī)方法培養(yǎng)人肺癌A549細胞和Lewis小鼠肺癌細胞(LLC)，并給與含不同劑量CS的培養(yǎng)液培養(yǎng)A549細胞和LLC，用MTT法檢測CS對兩種細胞增殖的影響;用流式細胞術(shù)(FCM) PI染色法檢測CS對兩種細胞周期的影響;利用Transwell侵襲侵襲實驗檢測CS對兩種細胞侵襲能力的影響。
　　 2、建立小鼠Lew

2、is肺癌模型，分為模型對照組（生理鹽水0.2 ml/d）、CS高劑量組[500 mg/(kg·d)-1]、低劑量組[100 mg/(kg·d)-1]和環(huán)磷酰胺組[50 mg/(kg·w)-1]，分別腹腔注射給藥。記錄各組小鼠的體重、生存時間和生活狀況，計算脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和抑瘤率。應用免疫組化的方法檢測CD44、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達。
　　 結(jié)果
　　 1、CS各濃度干預人肺癌A549，細胞生長均受到

3、限制;24h IC25值和IC50值分別為6.6mg/ml和28.4mg/ml。以7.0mg/ml和30mg/mlCS干預A549細胞24h后，F(xiàn)CM結(jié)果顯示細胞明顯被抑制在S期，抑制率分別為48.28％和57.21％(P＜0.05)。Transwell侵襲實驗顯示，CS對A549細胞侵襲力抑制率分別為47.89％和88.63％(P＜0.05)。
　　 2、CS各濃度干預LLC，細胞生長均受到限制;24h IC25值和IC50值

4、分別為7.9mg/ml和31.8mg/ml。以9.0mg/ml和30mg/mlCS干預LLC細胞24h后，F(xiàn)CM結(jié)果顯示細胞明顯被抑制在S期(P＜0.05)抑制率分別為42.80％和56.70％。Transwell侵襲實驗顯示，CS對LLC細胞侵襲力抑制率分別為54.32％和85.04％(P＜0.05)。
　　 3、CS各劑量組小鼠精神狀態(tài)、身體狀況較模型對照組和環(huán)磷酰胺組好，CS各劑量組和環(huán)磷酰胺組的胸腺指數(shù)、脾指數(shù)和抑瘤率均

5、明顯高于對照組(P＜0.05)，高劑量組各指標高于低劑量組(P＜0.05)。
　　 4、CS高、低劑量組和環(huán)磷酰胺組較生理鹽水組CD44、Bcl-2表達減少，Caspase-3表達增加(P＜0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1、CS對人肺癌A549細胞和Lewis小鼠肺癌細胞具有抑制增殖和侵襲的作用，其機制可能與抑制細胞分裂周期有關(guān)。
　　 2、CS能明顯減弱小鼠Lewis肺癌細胞的增殖能力，提高Lewis