重組hIL-10抗家兔皮膚移植排斥反應及其T淋巴細胞亞群的變化.pdf

1、目的：構(gòu)建同種異體家兔皮膚移植的動物模型；經(jīng)重組hIL-10蛋白作用后，觀察家兔皮膚移植后一般情況、皮片出現(xiàn)排斥的時間和皮片存活的時間；觀察家兔皮膚移植后T淋巴細胞亞群的變化，以探討重組hIL-10在抗皮膚移植機制中的作用。
　　 方法：1.家兔皮膚移植實驗：受體家兔隨機分組，分6組，每組3只，共18只；供體家兔共18只，隨機抽取與受體配對。移植前先背部剃毛，切除1.5cm×1.5cm大小面積的中厚皮片進行移植，每只家兔移植2片

2、皮片，縫合固定及單籠飼養(yǎng)。移植前1d開始肌肉注射藥物，連續(xù)注射，觀察術(shù)后各組家兔一般情況及皮片的情況。2.流式細胞檢測：用熒光雙標、直接法分別檢測移植前1d，移植后1d，4d，7d，14d，21d，28d各時間段各組家兔外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴細胞數(shù)的百分比以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值。
　　 結(jié)果：1.家兔情況：大劑量CsA組術(shù)后出現(xiàn)飲食、精神狀態(tài)欠佳、毛發(fā)脫落等現(xiàn)象，其余組均未

3、出現(xiàn)上述現(xiàn)象；皮片情況：術(shù)后3天去加壓包扎，見敷料干燥，皮片柔軟紅潤，張力適中，周邊整齊無滲出，術(shù)后4天開始陰性對照組出現(xiàn)排斥現(xiàn)象。2.皮膚開始出現(xiàn)排斥反應時間：低劑量hIL-10組為6.67±2.08d，高劑量rhIL-10組為9±3.60d，低劑量CsA組為12±1.0d，高劑量CsA組為19.67±1.15d，聯(lián)合組為16.67±1.15d，陰性對照組為4.33±0.58d，除低劑量rhIL-10組外，各組和陰性對照組之間差異都有

4、顯著意義（p<0.05）。3.皮膚存活時間：低劑量hIL-10組為13.33±3.05d，高劑量rhIL-10組為16±2.0d，低劑量CsA組為15.67±0.57d，高劑量CsA組為21.33±2.52d，聯(lián)合組為19±1.73d，陰性對照組7.67±1.15d，各實驗組與陰性對照組之間差異均有顯著意義（p<0.05）。4.在發(fā)生急性排斥反應時，CD3+CD4+T淋巴細胞數(shù)和CD3+CD4+/CD3+CD8+比值均升高，而CD3+C

5、D8+T淋巴數(shù)變化與排斥反應的發(fā)生無明顯關(guān)系。
　　 結(jié)論：1.動物實驗證實rhIL-10對同種異體家兔皮膚移植排斥有抑制作用，可推遲皮片排斥反應出現(xiàn)的時間，可延長移植皮片存活時間，并與CsA有協(xié)同作用。2.rhIL-10抑制CD3+CD4+T淋巴細胞活化，通過抑制細胞活化，降低IL-2，IFN-γ的產(chǎn)生，誘導Th1向Th2轉(zhuǎn)化，延緩排斥反應的發(fā)生。3.CD3+T淋巴數(shù)在移植術(shù)后均有不同程度升高，說明在受到外原刺激后引起CD3+