以核蛋白為靶標的新型流感病毒抑制劑的設計、合成與活性研究.pdf

1、流行性感冒（流感）是一種嚴重威脅人類生命健康的呼吸道傳染病，流感大流行已對社會和經(jīng)濟造成了嚴重的后果。隨著流感病毒的變異，宿主范圍的擴大，高致病性禽流感威脅的日益增強，流感的預防和治療已成為人類社會高度關注的公共衛(wèi)生問題。
　　 流感疫苗可以有效的預防和控制流感傳播?？沽鞲胁《靖腥舅幬铮∕2離子通道阻滯劑和神經(jīng)氨酸酶抑制劑，也可以用來預防和治療流感。然而疫苗與現(xiàn)有的抗流感病毒藥物均具有各自的缺點與不足，使它們的應用受到了各種

2、限制。作為流感的致病因子，流感病毒通過抗原漂移和抗原轉(zhuǎn)變等方式對疫苗與抗流感藥物的敏感性降低，使藥物的耐藥性問題日益突出。因此，開發(fā)新的抗流感病毒藥物是一項非常緊迫的任務。
　　 流感病毒核蛋白是高度保守的結構蛋白，在流感病毒的復制周期中起著關鍵性的作用，是流感病毒與宿主細胞相互作用的關鍵銜接分子，這使核蛋白成為抗流感病毒藥物研發(fā)過程中非常有潛力的靶點。研究證實以核蛋白為靶點設計抗流感病毒藥物是可行的，基于流感病毒核蛋白的藥物設

3、計與開發(fā)已成為抗流感病毒藥物研究領域的熱點之一。
　　 3-巰基-1，2，4-三氮唑衍生物是通過虛擬藥物篩選發(fā)現(xiàn)的流感病毒核蛋白抑制劑。體外實驗表明該類化合物對多種流感病毒株具有較好的抑制活性，其中包括耐金剛乙胺的A/California/07/2009(H1N1)病毒株。在動物實驗中，該類化合物也具有較好的預防和治療效果。因此以該類化合物為先導化合物通過進一步結構優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)新一代高效抗流感病毒核蛋白抑制劑具有重要的意義。

4、>　　 本課題利用生物電子等排體藥物設計策略，以3-巰基-1，2，4-三氮唑衍生物為先導化合物，設計并合成了吡唑氧乙酰腙衍生物和吡唑氧乙酰肼衍生物2個系列化合物。吡唑氧乙酰腙類化合物的合成以對甲基苯乙酸為起始原料，經(jīng)過酯化反應、親核加成-消除反應，環(huán)合反應得到羥基吡唑，再經(jīng)過親核取代、肼解生成中間體吡唑氧乙酰肼，最后經(jīng)親核加成反應，生成21個目標化合物(S6A-01～S6A-21)。吡唑氧乙酰肼類9個化合物(SB-01～SB-09)由

5、中間體吡唑氧乙酰肼經(jīng)親核加成-消除反應生成。30個目標化合物均未見文獻報道，其結構經(jīng)質(zhì)譜、紅外光譜和核磁共振氫譜分析確證。
　　 應用細胞病變法與中性紅染色法對吡唑氧乙酰腙類化合物進行了初步的體外抗流感病毒活性實驗，結果表明大部分化合物都具有不同程度抑制流感病毒復制的活性。有8個化合物的活性優(yōu)于金剛烷胺，其中S6A-07和S6A-19是活性最好的化合物。它們的EC50值分別是7.98μM和6.89μM，大約是金剛烷胺的4倍。然而

6、這些化合物的細胞毒性較大，選擇系數(shù)小于金剛烷胺。此外，本課題還對吡唑氧乙酰腙類化合物進行了抗HIV活性測試，但該系列化合物均未顯示出抗HIV活性。目前吡唑氧乙酰肼類化合物的抗流感病毒活性測試正在進行中。
　　 總之，本論文運用生物電子等排體藥物設計策略對3-巰基-1，2，4-三氮唑類核蛋白抑制劑進行了結構改造，設計合成了吡唑氧乙酰腙類和吡唑氧乙酰肼類2個系列共30個結構全新的目標化合物，其結構均經(jīng)光譜分析確證。體外抗流感病毒活性