牛磺酸鋅對(duì)冷應(yīng)激大鼠腦體功能保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的： 動(dòng)物急性(短期)暴露于寒冷環(huán)境中，即開始產(chǎn)生冷應(yīng)激反應(yīng)，可引起學(xué)習(xí)記憶、行為、情緒等高級(jí)功能障礙。在機(jī)體所有器官中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)對(duì)應(yīng)激反應(yīng)最為敏感。?；撬?Tau)對(duì)腦發(fā)育和腦功能的維持起重要作用，而鋅(Zn)是公認(rèn)的腦功能保護(hù)劑，并已明確鋅有抗疲勞作用。本研究通過觀測(cè)?；撬徜\(TZC)對(duì)冷應(yīng)激大鼠腦體功能、皮層和海馬結(jié)構(gòu)NOS活力、nNOS蛋白和基因表達(dá)及HIF-1a mRNA表達(dá)的影響，研究TZC對(duì)冷應(yīng)激大

2、鼠腦體功能保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制。 方法： 取健康雄性體重(105±15)g Wistar大鼠80只(天津?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中心)，隨機(jī)分為4組(n=20)：正常對(duì)照組、正常水溫組、單純冷浴組、TZC冷浴組(飲0.34g/L TZC水，普通飼料)，喂養(yǎng)30d。復(fù)制大鼠冷應(yīng)激模型，在冷應(yīng)激結(jié)束后2h，采用“Y”迷宮和斜板實(shí)驗(yàn)測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及運(yùn)動(dòng)耐力，NADPH-d組織化學(xué)、ABC免疫組織化學(xué)和RT-PCR方法測(cè)定大鼠腦組織NOS

3、的活性、nNOS蛋白和基因表達(dá)水平以及HIF-1a基因表達(dá)水平。 結(jié)果： 1．腦體功能測(cè)試結(jié)果 (1)體重增量：冷浴前各組大鼠體重增量比較無顯著性差異(P>0.05)。在冷浴后2h和4h，TZC冷浴組和單純冷浴組體重增量較正常對(duì)照組和正常水溫組均明顯降低(P<0.05)，在冷浴后6h，只有單純冷浴組較正常對(duì)照組和正常水溫組明顯降低(P<0.05)。在冷浴后8h，各組間比較均無顯著性差異(P>0.05) (

4、2)Y-迷宮實(shí)驗(yàn)：?jiǎn)渭兝湓〈笫竺詫m實(shí)驗(yàn)正確率較正常對(duì)照大鼠明顯下降，差異有顯著性(P<0.05)，同時(shí)其正確率較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯下降(P<0.05)；而正常對(duì)照組、正常水溫組、TZC冷浴組之間兩兩比較，均無顯著性差異(P>0.05)。 (3)斜板實(shí)驗(yàn)：在冷浴后2h、4h，單純冷浴大鼠與正常對(duì)照組比較，斜板實(shí)驗(yàn)角度明顯降低(P<0.05)，同時(shí)較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯下降(P<0.05)；TZC冷浴組與正常對(duì)

5、照組比較，只在冷浴后2h斜板實(shí)驗(yàn)角度明顯降低(P<0.05)； 在冷浴后其它時(shí)間點(diǎn)各組間均無顯著性差異(P>0.05)。 2、NADPH-d組織化學(xué)和nNos免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 冷應(yīng)激后，各實(shí)驗(yàn)組大鼠皮層和海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)NADPH-d、nNOS神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)和分布模式與正常對(duì)照組無明顯區(qū)別。單純冷浴組大鼠與正常對(duì)照組相比，皮層和海馬CA<,1>區(qū)NADPH-d、nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)量明顯增多，差異有顯著性(P<0.

6、05)，同時(shí)較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯增多(P<0.05)：而正常對(duì)照組、正常水溫組、TZC冷浴組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。在海馬CA<,3>區(qū)和DG，各組大鼠NADPH-d、nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)量未見明顯變化。 3、RT-PCR結(jié)果 (1)?；撬徜\對(duì)冷應(yīng)激大鼠nNOS mRNA表達(dá)的影響：?jiǎn)渭兝湓〗M大鼠皮層nNOS產(chǎn)物電泳條帶相對(duì)較強(qiáng)，產(chǎn)量較高，其光密度值較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05)，同時(shí)

7、較正常水溫組和TZC冷浴組也明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；而正常對(duì)照組、正常水溫組、TZC冷浴組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。 (2)?；撬徜\對(duì)冷應(yīng)激大鼠HIF-1a mRNA表達(dá)的影響：正常對(duì)照組和正常水溫組無HIF-1a mRNA表達(dá)，而冷浴后TzC冷浴組和單純冷浴組大鼠腦組織HW-1a mRNA相對(duì)含量較正常對(duì)照組和正常水溫組均明顯升高(P<0.05)；其中TZC冷浴組電泳條帶最亮，吸光度值最高，HI