血管新生、血型抗原、核增殖性抗原在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá).pdf

1、目的：采用流式細(xì)胞技術(shù)、免疫組化、ELISA方法檢測(cè)膀胱移行細(xì)胞癌中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體的表達(dá)情況，探討血管新生與膀胱移行細(xì)胞癌的生物學(xué)關(guān)系。研究血型抗原Lewis X、核增殖抗原Ki-67在膀胱移行細(xì)胞癌(BTCC)中的定量表達(dá)，探討這兩種抗原在膀胱移行細(xì)胞癌中致病和診斷作用。 第一部分 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá) 方法： 1.新鮮組織VEGF、VEGFR測(cè)定：收集膀胱移行細(xì)胞癌新鮮組織

2、及非膀胱腫瘤組織， 經(jīng)過(guò)剪碎、研磨、洗滌、過(guò)濾后制成單細(xì)胞懸液。加入熒光抗體后，流式細(xì)胞儀 分析細(xì)胞表面的VEGF、VEGFR的表達(dá)。 2.血漿中VEGF測(cè)定：用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法) 3.病理標(biāo)本MVD、VEGF測(cè)定：將膀胱移行細(xì)胞癌組織制成病理切片后，采用SP二步法進(jìn)行免疫組化染色，計(jì)算MVD、VEGF 的表達(dá)。 研究對(duì)象： 1.病例組：45例膀胱移行細(xì)胞癌組織，所有膀胱移行細(xì)胞癌組織取

3、自于手術(shù)切除標(biāo)本及血漿。 2.對(duì)照組：10例為非膀胱腫瘤組織：30例正常成人血漿。 結(jié)果： 1.膀胱移行細(xì)胞癌患者中VEGF、VEGFR明顯高于對(duì)照組，VEGF、VEGFR在不同的病理分級(jí)、分期中有不同的表達(dá)。手術(shù)前與手術(shù)后患者血漿中VEGF的濃度有顯著差異。 2．膀胱移行細(xì)胞癌MVD高于對(duì)照組，且與膀胱癌的病理分級(jí)、分期有關(guān)。 結(jié)論：VEGF、VEGFR在膀胱移行細(xì)胞癌中有高度的表達(dá)；VEGF、

4、VEGFR與膀胱癌病理分期、分級(jí)的生物學(xué)行為有密切的關(guān)系。手術(shù)前患者血漿中VEGF水平明顯高于手術(shù)后。 第二部分 血型抗原Lewis X與核增殖性抗原Ki-67在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá) 方法： 1.血型抗原Lewis X測(cè)定：膀胱癌單細(xì)胞懸液的制備，F(xiàn)ITC標(biāo)記的Lewis X抗體與 細(xì)胞表面的Lewis X結(jié)合，流式細(xì)胞術(shù)分析Lewis X的表達(dá)。 2.核增殖性抗原Ki-67測(cè)定：膀胱癌單細(xì)胞懸液的

5、制備，破膜劑破膜后，F(xiàn)ITC標(biāo)記的 Ki-67單抗與細(xì)胞核內(nèi)Ki-67反應(yīng)，以流式細(xì)胞術(shù)分析Ki-67的表達(dá)。 研究對(duì)象： 1.病例組：收集手術(shù)切除的膀胱癌組織標(biāo)本36例，所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)為膀胱 移行細(xì)胞癌。 2.對(duì)照組：取10例因良性前列腺增生而行開(kāi)放手術(shù)所獲非腫瘤膀胱黏膜為對(duì)照 組。 結(jié)果： 1.Lewis X抗原在膀胱移行細(xì)胞癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為52.58±22.69％，在非腫瘤膀胱

6、 組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為24.38±4.97％，兩者間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)Lewis X 的陽(yáng)性表達(dá)率與膀胱移行細(xì)胞癌的臨床分期，病理分級(jí)無(wú)關(guān)(p>0.05)。 2.Ki-67在膀胱移行細(xì)胞癌組織中的表達(dá)率為10.89±7.88％，正常膀胱黏膜組織中膀胱移行細(xì)胞幾乎不表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率僅為0.27±0.07％，兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (p<0.01)：臨床分期T<,is>～T<,1>為4.93±2.95％，T<,2>～T